通过一锅法恒温连接和转录反应实现临床样本中的SARS-CoV-2 灵敏荧光检测

生物技术 荧光检测技术
钱晓鹤    2021-01-05    709

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  控制病毒暴发需要敏感,简单和快速的核酸诊断检测。韩国浦项科技大学的Gyoo Yeol Jung教授和JeongWook Lee教授团队报告了一种高灵敏度和特异性的一锅法,用于基于荧光的病原体RNA检测。该测定可以在孵育30–50分钟内完成,并且可以达到检测0.1aM RNA的极限,它依赖于持续的等温级联反应,产生能与荧光染料结合的RNA适体。启动子DNA探针和报道DNA探针通过SplintR连接酶与目标单链RNA序列杂交,之后T7RNA聚合酶从连接产物中转录RNA适体。在40份鼻咽SARS-CoV-2样本中,该检测法分别达到95%和100%的阳性和阴性预测值。该测定法还可以快速检测一系列病毒和细菌RNA。

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  Figure 1. 一锅等温级联反应,用于快速检测RNA。

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  Figure 2. 一锅法检测中的三部分反应构建。

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  Figure 3. 一锅法检测的广泛适应性。

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  Figure 4. 一锅法用于检测双RNA。

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  Figure 5. 一锅法用于双重检测SARS-CoV-2。

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