重组蛋白的表达与纯化

合作方式:委托开发

所属行业:

细胞表达纯化重组蛋白
案例企业需求背景
服务流程与成效

服务流程:

重组C因子的表达和纯化难点在于保持C因子的天然结构和活性的同时实现高效表达。

1.表达体系的选择:选择Bac-to-Bac杆状病毒-昆虫细胞Sf9表达系统。

2.表达载体的构建

选择pFastBac载体,插入gp67信号肽优化表达载体、优化C因子H链和L链的密码子。

3.表达及纯化测试

采用单因素多水平的梯度实验和正交设计实验相结合,获得最优的表达工艺:先分别转染H链和L链于昆虫细胞,经过P1\P2带病毒生产及表达测试,确定H链和L链病毒的感染比例和时间的最佳配比。

4. 大量表达及纯化

纯化后重组C因子活性和纯度的检测

经过亲和层析柱纯化浓缩、SDS-PAGEMS鉴定,成功表达出重组C因子。

服务收益:

 1)经济效益

基于目前日益增长的市场需求(该检测试剂盒不仅用于临床检测,在个行业中如食品工业、制药、医疗保健、农业、污水处理厂、运输仓储和公用事业、国防、环境、纺织工业、细胞培养和重组治疗产品均要求强制性监测),市场对内毒素检测试剂的需求很大。以20192.5亿的市场规模来计算,重组C因子检测试剂盒预计为公司带来上千万元的经济效益。

2)生态效益

目前,我国每年对该试剂的需求为3500万支,研发出可替代的重组C因子,将减少公司采用天然生物提取,树立公司保护资源的企业形象和行业标杆。