技术简介
目前随着抗肿瘤药物的研制及临床应用方法的改进,肿瘤、免疫系统疾病等的疗效得到很大的提高,但已有研究证实抗肿瘤药物既可杀死或抑制肿瘤细胞生长,同时也可造成严重的生育功能损害。儿童肿瘤及免疫系统疾病的发生率也在逐年增加,抗肿瘤药物使用更加频繁,所造成的睾丸损害因其处于正发育时期,因此其损害不但影响性腺发育,还将导致其成年后生育功能障碍,越来越多的肿瘤“幸存”患儿的远期生育功能也逐渐引起临床高度重视。但是,目前对发育中的睾丸是否会受到损伤和如何保护的机理问题确研究甚少。抗肿瘤药物,特别是烷化剂,因其疗效显著,至今仍是治疗恶性肿瘤、自身免疫性疾病、器官及细胞移植中最为常用的药物。国内外学者通过临床随访发现,在儿童期因白血病、实体肿瘤、自身免疫性疾病接受烷化剂治疗的男性患儿,成年后80.2%~94.1%无精子或少精子症,以致于不育、流产、死胎,或者出现子代遗传性缺陷或畸形,美国国立癌症防治中心曾报告2283名在儿童和青少年时期接受过化疗的病人,成年后有近15%没有生育,然而烷化剂对睾丸生殖毒性损伤机理仍不清楚。已有的研究多是组织形态学观察,如睾丸体积缩小、重量减轻,生精上皮疏松或空泡化,生精上皮中绝大多数精原细胞丢失等,同时观察到分子生物学改变,包括精子细胞染色体易位、重组障碍,DNA断裂;精母细胞、精子细胞功能基因差异表达等,这些研究的焦点均是针对烷化剂对生殖细胞的直接损伤。但在研究中发现虽在相邻Sertoli细胞基底部和萎缩的基底层仍有单个精原细胞(Spermatogonial stem cells,SSCSs)残存,然而这些从残存的SSCs开始的精子发生很难恢复到正常水平,其原因很可能与生殖细胞发育所依赖的微环境的损伤有关,尤其是微环境中最重要Sertoli细胞的结构及功能损伤等但至今却未见报告。对于如何防护抗肿瘤药物的生育损害问题,目前主要局限在改变化疗方案和生殖辅助技术等方面。但前者可能影响化疗效果,后者尚受技术和伦理上的限制。因此,很有必要在探讨抗肿瘤药物对未成熟睾丸损害机理的基础上探寻有效的保护措施,以减少或避免未成熟睾丸的损害。在烷化剂对肿瘤细胞、骨髓、肝脏的毒性损伤机理细胞毒性损伤机理中证实,烷化剂的重要机理之一是诱导细胞内过氧化反应,导致细胞内氧化—抗氧化系统失衡。同理,我们推测烷化剂对生精上皮毒性损伤中,同样可能存在过氧化反应,导致氧化—抗氧化系统失衡,有人曾试用VitE、VitC、VitA、番茄红素消除自由基,对抗抗肿瘤药物的氧化作用,但其作用不明显。近年研究发现,祖国中药宝库中有很多含有抗氧化清除自由基成分的中药,银杏黄酮和叶下珠植物(Phyllanthus urinaria L,PU)是它们中的典型代表。研究证实黄酮类化合物可以通过直接捕捉和清除超氧阴离子和过氧化氢等自由基起抗氧化作用。PU具有抗氧化及保护内源性或外源性毒物对肝功能、心肌毒性损害,而且,PU能有效地保护环磷酰胺和放疗对小鼠骨髓的损害。因此,我们推测,银杏黄酮和PU可能同样通过抗氧化途径干预烷化剂的睾丸生殖毒性。