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找技术 >一株共表达 L‑ 乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一株共表达L-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆菌,其特征在于,它是导入了来源于凝结芽孢杆菌的L-乳酸脱氢酶基因ldhL和来源于博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh的大肠杆菌;其中,所述的L-乳酸脱氢酶基因ldhL,其核苷酸序列的GenBank登记号为KF386111;所述的甲酸脱氢酶基因fdh,其核苷酸序列的GenBank登记号为AJ011046。本发明还公开了上述重组大肠干菌的构建方法和应用。本发明方法具有操作简单,成本低,产物合成效率高,光学纯度高的特点,为生物合成L-苯乳酸提供了有效途径。
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗,其特征在于依次包括鸡防御素-1基因片段的PCR扩增过程、重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1的构建过程、鸡法氏囊病病毒VP2基因的PCR扩增过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2的构建过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2培养过程提取过程。本[发明专利]与已有技术相比,具有防御素所特有的免疫增强作用的、适合鸡使用的、可用于预防鸡传染性法氏囊病的优点。
一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法,属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K,并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO:M 2012266的菌株中,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。
一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因folA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因metF序列。本发明提供的提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L-5-甲基四氢叶酸原始细菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中L-5-甲基四氢叶酸累积量显著高于原始细菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗,为生物法合成L-5-甲基四氢叶酸的产业化奠定了基础。
抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用。本发明所提供的抗菌肽融合细胞因子CAMPILs为如下A1)、A2)或A3)A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质;A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明,本发明的CAMPILs可以促进淋巴细胞、红细胞和白细胞的增殖,抑制致病微生物的生长,促进非特异性抗体(IgG、IgG1、IgG2a)及疾病特异抗体的分泌,提高动物的免疫能力与存活率。
一种双质粒工程菌提高L-5-甲基四氢叶酸产量的生物方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和和一种L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)基因GlyA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因MetF序列。本发明提供的提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L‑5‑甲基四氢叶酸原始菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中,重组菌累积的L‑5‑甲基四氢叶酸显著高于原始菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗。
一种共表达CYP和CPR的酵母系统
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及一种用于体外药物代谢性质评价的药物代谢酶异源表达系统,具体的说一种共表达CYP和CPR的酵母表达系统,分别带有CPR的DNA片段和CYP的DNA片段的酵母表达载体转导酵母细胞中,这两个表达载体分别以整合型和游离型的方式在酵母细胞中表达,重组的酵母细胞经发酵诱导,得到的酵母细胞制备物即为目的表达系统,其可应用于CYP酶系体外药物代谢性质的评价。所构建成新的酿酒酵母共表达系统可广泛地应用于氧化还原酶体系如细胞色素P450酶系,后者被广泛地应用于涉及ADME/T和药代动力学中药物代谢等的筛选、应用和开发。
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找技术 >一株共表达 L‑ 乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆
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本发明公开了一株共表达L-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆菌,其特征在于,它是导入了来源于凝结芽孢杆菌的L-乳酸脱氢酶基因ldhL和来源于博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh的大肠杆菌;其中,所述的L-乳酸脱氢酶基因ldhL,其核苷酸序列的GenBank登记号为KF386111;所述的甲酸脱氢酶基因fdh,其核苷酸序列的GenBank登记号为AJ011046。本发明还公开了上述重组大肠干菌的构建方法和应用。本发明方法具有操作简单,成本低,产物合成效率高,光学纯度高的特点,为生物合成L-苯乳酸提供了有效途径。
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗
成熟度:正在研发
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一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗,其特征在于依次包括鸡防御素-1基因片段的PCR扩增过程、重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1的构建过程、鸡法氏囊病病毒VP2基因的PCR扩增过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2的构建过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2培养过程提取过程。本[发明专利]与已有技术相比,具有防御素所特有的免疫增强作用的、适合鸡使用的、可用于预防鸡传染性法氏囊病的优点。
一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法
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摘要:本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法,属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K,并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO:M 2012266的菌株中,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
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技术简介
摘要:本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。
一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
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本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因folA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因metF序列。本发明提供的提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L-5-甲基四氢叶酸原始细菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中L-5-甲基四氢叶酸累积量显著高于原始细菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗,为生物法合成L-5-甲基四氢叶酸的产业化奠定了基础。
抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用
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本发明公开了抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用。本发明所提供的抗菌肽融合细胞因子CAMPILs为如下A1)、A2)或A3)A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质;A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明,本发明的CAMPILs可以促进淋巴细胞、红细胞和白细胞的增殖,抑制致病微生物的生长,促进非特异性抗体(IgG、IgG1、IgG2a)及疾病特异抗体的分泌,提高动物的免疫能力与存活率。
一种双质粒工程菌提高L-5-甲基四氢叶酸产量的生物方法
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本发明提供了一种提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和和一种L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)基因GlyA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因MetF序列。本发明提供的提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L‑5‑甲基四氢叶酸原始菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中,重组菌累积的L‑5‑甲基四氢叶酸显著高于原始菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗。
一种共表达CYP和CPR的酵母系统
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本发明涉及一种用于体外药物代谢性质评价的药物代谢酶异源表达系统,具体的说一种共表达CYP和CPR的酵母表达系统,分别带有CPR的DNA片段和CYP的DNA片段的酵母表达载体转导酵母细胞中,这两个表达载体分别以整合型和游离型的方式在酵母细胞中表达,重组的酵母细胞经发酵诱导,得到的酵母细胞制备物即为目的表达系统,其可应用于CYP酶系体外药物代谢性质的评价。所构建成新的酿酒酵母共表达系统可广泛地应用于氧化还原酶体系如细胞色素P450酶系,后者被广泛地应用于涉及ADME/T和药代动力学中药物代谢等的筛选、应用和开发。
找到8项技术成果数据。
找技术 >一株共表达 L‑ 乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆
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本发明公开了一株共表达L-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆菌,其特征在于,它是导入了来源于凝结芽孢杆菌的L-乳酸脱氢酶基因ldhL和来源于博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh的大肠杆菌;其中,所述的L-乳酸脱氢酶基因ldhL,其核苷酸序列的GenBank登记号为KF386111;所述的甲酸脱氢酶基因fdh,其核苷酸序列的GenBank登记号为AJ011046。本发明还公开了上述重组大肠干菌的构建方法和应用。本发明方法具有操作简单,成本低,产物合成效率高,光学纯度高的特点,为生物合成L-苯乳酸提供了有效途径。
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗
成熟度:正在研发
技术类型:发明
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一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗,其特征在于依次包括鸡防御素-1基因片段的PCR扩增过程、重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1的构建过程、鸡法氏囊病病毒VP2基因的PCR扩增过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2的构建过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2培养过程提取过程。本[发明专利]与已有技术相比,具有防御素所特有的免疫增强作用的、适合鸡使用的、可用于预防鸡传染性法氏囊病的优点。
一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法
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技术简介
摘要:本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法,属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K,并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO:M 2012266的菌株中,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
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技术简介
摘要:本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。
一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
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技术简介
本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因folA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因metF序列。本发明提供的提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L-5-甲基四氢叶酸原始细菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中L-5-甲基四氢叶酸累积量显著高于原始细菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗,为生物法合成L-5-甲基四氢叶酸的产业化奠定了基础。
抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用。本发明所提供的抗菌肽融合细胞因子CAMPILs为如下A1)、A2)或A3)A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质;A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明,本发明的CAMPILs可以促进淋巴细胞、红细胞和白细胞的增殖,抑制致病微生物的生长,促进非特异性抗体(IgG、IgG1、IgG2a)及疾病特异抗体的分泌,提高动物的免疫能力与存活率。
一种双质粒工程菌提高L-5-甲基四氢叶酸产量的生物方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
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技术简介
本发明提供了一种提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和和一种L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)基因GlyA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因MetF序列。本发明提供的提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L‑5‑甲基四氢叶酸原始菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中,重组菌累积的L‑5‑甲基四氢叶酸显著高于原始菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗。
一种共表达CYP和CPR的酵母系统
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技术类型:发明
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技术简介
本发明涉及一种用于体外药物代谢性质评价的药物代谢酶异源表达系统,具体的说一种共表达CYP和CPR的酵母表达系统,分别带有CPR的DNA片段和CYP的DNA片段的酵母表达载体转导酵母细胞中,这两个表达载体分别以整合型和游离型的方式在酵母细胞中表达,重组的酵母细胞经发酵诱导,得到的酵母细胞制备物即为目的表达系统,其可应用于CYP酶系体外药物代谢性质的评价。所构建成新的酿酒酵母共表达系统可广泛地应用于氧化还原酶体系如细胞色素P450酶系,后者被广泛地应用于涉及ADME/T和药代动力学中药物代谢等的筛选、应用和开发。
找到8项技术成果数据。
找技术 >一株共表达 L‑ 乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆
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技术简介
本发明公开了一株共表达L-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆菌,其特征在于,它是导入了来源于凝结芽孢杆菌的L-乳酸脱氢酶基因ldhL和来源于博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh的大肠杆菌;其中,所述的L-乳酸脱氢酶基因ldhL,其核苷酸序列的GenBank登记号为KF386111;所述的甲酸脱氢酶基因fdh,其核苷酸序列的GenBank登记号为AJ011046。本发明还公开了上述重组大肠干菌的构建方法和应用。本发明方法具有操作简单,成本低,产物合成效率高,光学纯度高的特点,为生物合成L-苯乳酸提供了有效途径。
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗,其特征在于依次包括鸡防御素-1基因片段的PCR扩增过程、重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1的构建过程、鸡法氏囊病病毒VP2基因的PCR扩增过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2的构建过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2培养过程提取过程。本[发明专利]与已有技术相比,具有防御素所特有的免疫增强作用的、适合鸡使用的、可用于预防鸡传染性法氏囊病的优点。
一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法,属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K,并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO:M 2012266的菌株中,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
成熟度:正在研发
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应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。
一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
成熟度:正在研发
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技术简介
本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因folA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因metF序列。本发明提供的提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L-5-甲基四氢叶酸原始细菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中L-5-甲基四氢叶酸累积量显著高于原始细菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗,为生物法合成L-5-甲基四氢叶酸的产业化奠定了基础。
抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用
成熟度:正在研发
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本发明公开了抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用。本发明所提供的抗菌肽融合细胞因子CAMPILs为如下A1)、A2)或A3)A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质;A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明,本发明的CAMPILs可以促进淋巴细胞、红细胞和白细胞的增殖,抑制致病微生物的生长,促进非特异性抗体(IgG、IgG1、IgG2a)及疾病特异抗体的分泌,提高动物的免疫能力与存活率。
一种双质粒工程菌提高L-5-甲基四氢叶酸产量的生物方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和和一种L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)基因GlyA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因MetF序列。本发明提供的提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L‑5‑甲基四氢叶酸原始菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中,重组菌累积的L‑5‑甲基四氢叶酸显著高于原始菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗。
一种共表达CYP和CPR的酵母系统
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及一种用于体外药物代谢性质评价的药物代谢酶异源表达系统,具体的说一种共表达CYP和CPR的酵母表达系统,分别带有CPR的DNA片段和CYP的DNA片段的酵母表达载体转导酵母细胞中,这两个表达载体分别以整合型和游离型的方式在酵母细胞中表达,重组的酵母细胞经发酵诱导,得到的酵母细胞制备物即为目的表达系统,其可应用于CYP酶系体外药物代谢性质的评价。所构建成新的酿酒酵母共表达系统可广泛地应用于氧化还原酶体系如细胞色素P450酶系,后者被广泛地应用于涉及ADME/T和药代动力学中药物代谢等的筛选、应用和开发。
找到8项技术成果数据。
找技术 >一株共表达 L‑ 乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一株共表达L-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆菌,其特征在于,它是导入了来源于凝结芽孢杆菌的L-乳酸脱氢酶基因ldhL和来源于博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh的大肠杆菌;其中,所述的L-乳酸脱氢酶基因ldhL,其核苷酸序列的GenBank登记号为KF386111;所述的甲酸脱氢酶基因fdh,其核苷酸序列的GenBank登记号为AJ011046。本发明还公开了上述重组大肠干菌的构建方法和应用。本发明方法具有操作简单,成本低,产物合成效率高,光学纯度高的特点,为生物合成L-苯乳酸提供了有效途径。
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗,其特征在于依次包括鸡防御素-1基因片段的PCR扩增过程、重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1的构建过程、鸡法氏囊病病毒VP2基因的PCR扩增过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2的构建过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2培养过程提取过程。本[发明专利]与已有技术相比,具有防御素所特有的免疫增强作用的、适合鸡使用的、可用于预防鸡传染性法氏囊病的优点。
一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法,属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K,并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO:M 2012266的菌株中,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。
一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因folA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因metF序列。本发明提供的提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L-5-甲基四氢叶酸原始细菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中L-5-甲基四氢叶酸累积量显著高于原始细菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗,为生物法合成L-5-甲基四氢叶酸的产业化奠定了基础。
抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用。本发明所提供的抗菌肽融合细胞因子CAMPILs为如下A1)、A2)或A3)A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质;A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明,本发明的CAMPILs可以促进淋巴细胞、红细胞和白细胞的增殖,抑制致病微生物的生长,促进非特异性抗体(IgG、IgG1、IgG2a)及疾病特异抗体的分泌,提高动物的免疫能力与存活率。
一种双质粒工程菌提高L-5-甲基四氢叶酸产量的生物方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和和一种L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)基因GlyA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因MetF序列。本发明提供的提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L‑5‑甲基四氢叶酸原始菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中,重组菌累积的L‑5‑甲基四氢叶酸显著高于原始菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗。
一种共表达CYP和CPR的酵母系统
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
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本发明涉及一种用于体外药物代谢性质评价的药物代谢酶异源表达系统,具体的说一种共表达CYP和CPR的酵母表达系统,分别带有CPR的DNA片段和CYP的DNA片段的酵母表达载体转导酵母细胞中,这两个表达载体分别以整合型和游离型的方式在酵母细胞中表达,重组的酵母细胞经发酵诱导,得到的酵母细胞制备物即为目的表达系统,其可应用于CYP酶系体外药物代谢性质的评价。所构建成新的酿酒酵母共表达系统可广泛地应用于氧化还原酶体系如细胞色素P450酶系,后者被广泛地应用于涉及ADME/T和药代动力学中药物代谢等的筛选、应用和开发。
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找技术 >一株共表达 L‑ 乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆
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本发明公开了一株共表达L-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆菌,其特征在于,它是导入了来源于凝结芽孢杆菌的L-乳酸脱氢酶基因ldhL和来源于博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh的大肠杆菌;其中,所述的L-乳酸脱氢酶基因ldhL,其核苷酸序列的GenBank登记号为KF386111;所述的甲酸脱氢酶基因fdh,其核苷酸序列的GenBank登记号为AJ011046。本发明还公开了上述重组大肠干菌的构建方法和应用。本发明方法具有操作简单,成本低,产物合成效率高,光学纯度高的特点,为生物合成L-苯乳酸提供了有效途径。
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗,其特征在于依次包括鸡防御素-1基因片段的PCR扩增过程、重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1的构建过程、鸡法氏囊病病毒VP2基因的PCR扩增过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2的构建过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2培养过程提取过程。本[发明专利]与已有技术相比,具有防御素所特有的免疫增强作用的、适合鸡使用的、可用于预防鸡传染性法氏囊病的优点。
一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法,属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K,并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO:M 2012266的菌株中,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。
一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
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技术简介
本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因folA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因metF序列。本发明提供的提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L-5-甲基四氢叶酸原始细菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中L-5-甲基四氢叶酸累积量显著高于原始细菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗,为生物法合成L-5-甲基四氢叶酸的产业化奠定了基础。
抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用。本发明所提供的抗菌肽融合细胞因子CAMPILs为如下A1)、A2)或A3)A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质;A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明,本发明的CAMPILs可以促进淋巴细胞、红细胞和白细胞的增殖,抑制致病微生物的生长,促进非特异性抗体(IgG、IgG1、IgG2a)及疾病特异抗体的分泌,提高动物的免疫能力与存活率。
一种双质粒工程菌提高L-5-甲基四氢叶酸产量的生物方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和和一种L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)基因GlyA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因MetF序列。本发明提供的提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L‑5‑甲基四氢叶酸原始菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中,重组菌累积的L‑5‑甲基四氢叶酸显著高于原始菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗。
一种共表达CYP和CPR的酵母系统
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及一种用于体外药物代谢性质评价的药物代谢酶异源表达系统,具体的说一种共表达CYP和CPR的酵母表达系统,分别带有CPR的DNA片段和CYP的DNA片段的酵母表达载体转导酵母细胞中,这两个表达载体分别以整合型和游离型的方式在酵母细胞中表达,重组的酵母细胞经发酵诱导,得到的酵母细胞制备物即为目的表达系统,其可应用于CYP酶系体外药物代谢性质的评价。所构建成新的酿酒酵母共表达系统可广泛地应用于氧化还原酶体系如细胞色素P450酶系,后者被广泛地应用于涉及ADME/T和药代动力学中药物代谢等的筛选、应用和开发。
找到8项技术成果数据。
找技术 >一株共表达 L‑ 乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一株共表达L-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆菌,其特征在于,它是导入了来源于凝结芽孢杆菌的L-乳酸脱氢酶基因ldhL和来源于博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh的大肠杆菌;其中,所述的L-乳酸脱氢酶基因ldhL,其核苷酸序列的GenBank登记号为KF386111;所述的甲酸脱氢酶基因fdh,其核苷酸序列的GenBank登记号为AJ011046。本发明还公开了上述重组大肠干菌的构建方法和应用。本发明方法具有操作简单,成本低,产物合成效率高,光学纯度高的特点,为生物合成L-苯乳酸提供了有效途径。
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗,其特征在于依次包括鸡防御素-1基因片段的PCR扩增过程、重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1的构建过程、鸡法氏囊病病毒VP2基因的PCR扩增过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2的构建过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2培养过程提取过程。本[发明专利]与已有技术相比,具有防御素所特有的免疫增强作用的、适合鸡使用的、可用于预防鸡传染性法氏囊病的优点。
一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法,属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K,并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO:M 2012266的菌株中,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。
一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因folA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因metF序列。本发明提供的提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L-5-甲基四氢叶酸原始细菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中L-5-甲基四氢叶酸累积量显著高于原始细菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗,为生物法合成L-5-甲基四氢叶酸的产业化奠定了基础。
抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用。本发明所提供的抗菌肽融合细胞因子CAMPILs为如下A1)、A2)或A3)A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质;A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明,本发明的CAMPILs可以促进淋巴细胞、红细胞和白细胞的增殖,抑制致病微生物的生长,促进非特异性抗体(IgG、IgG1、IgG2a)及疾病特异抗体的分泌,提高动物的免疫能力与存活率。
一种双质粒工程菌提高L-5-甲基四氢叶酸产量的生物方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和和一种L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)基因GlyA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因MetF序列。本发明提供的提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L‑5‑甲基四氢叶酸原始菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中,重组菌累积的L‑5‑甲基四氢叶酸显著高于原始菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗。
一种共表达CYP和CPR的酵母系统
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及一种用于体外药物代谢性质评价的药物代谢酶异源表达系统,具体的说一种共表达CYP和CPR的酵母表达系统,分别带有CPR的DNA片段和CYP的DNA片段的酵母表达载体转导酵母细胞中,这两个表达载体分别以整合型和游离型的方式在酵母细胞中表达,重组的酵母细胞经发酵诱导,得到的酵母细胞制备物即为目的表达系统,其可应用于CYP酶系体外药物代谢性质的评价。所构建成新的酿酒酵母共表达系统可广泛地应用于氧化还原酶体系如细胞色素P450酶系,后者被广泛地应用于涉及ADME/T和药代动力学中药物代谢等的筛选、应用和开发。
找到8项技术成果数据。
找技术 >一株共表达 L‑ 乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了一株共表达L-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的大肠杆菌,其特征在于,它是导入了来源于凝结芽孢杆菌的L-乳酸脱氢酶基因ldhL和来源于博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh的大肠杆菌;其中,所述的L-乳酸脱氢酶基因ldhL,其核苷酸序列的GenBank登记号为KF386111;所述的甲酸脱氢酶基因fdh,其核苷酸序列的GenBank登记号为AJ011046。本发明还公开了上述重组大肠干菌的构建方法和应用。本发明方法具有操作简单,成本低,产物合成效率高,光学纯度高的特点,为生物合成L-苯乳酸提供了有效途径。
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
一种基因共表达重组质粒及由该质粒制成的DNA疫苗,其特征在于依次包括鸡防御素-1基因片段的PCR扩增过程、重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1的构建过程、鸡法氏囊病病毒VP2基因的PCR扩增过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2的构建过程、鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡防御素-1基因共表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Gal-1/VP2培养过程提取过程。本[发明专利]与已有技术相比,具有防御素所特有的免疫增强作用的、适合鸡使用的、可用于预防鸡传染性法氏囊病的优点。
一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强葡萄糖氧化酶分泌的方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明公开了一种共表达UPR关键基因和下游靶基因增强分泌表达葡萄糖氧化酶的方法,属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母UPR关键基因Haclp与下游靶基因Pdi1、Ero1、Lhs1、Kar2、Sil1分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pPICZα与pPIC3.5K,并转化入Pichia pastoris GS115-pPIC9K-GOD保藏编号为CCTCC NO:M 2012266的菌株中,经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活585U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
摘要:本发明涉及一种毕赤酵母中共表达血红蛋白VHb和纤维素酶蛋白的构建方法,具体涉及纤维素酶蛋白基因密码子优化及其与透明颤菌血红蛋白(VHb)共表达毕赤酵母体系的构建。本发明利用Gene Designer(DNA2.0,Menlo Park,CA,USA)软件对EG II(GenBank Accession No.DQ178347.1)核苷酸序列进行密码子偏向性优化,构建了pPIC9K-eg2表达载体,并以Pichiapastoris GS115为宿主通过电转化获得重组毕赤酵母菌株。另外,从NCBI中获得VHb(GenBank Accession No.M30794.1)核苷酸序列,通过人工合成基因后构建了pPICZαA-vgb表达载体,以含EG II基因重组毕赤酵母菌株作为宿主,通过电转化获得共表达毕赤酵母菌株。通过检测表明,共表达菌株在菌浓生长与酶活方面均有提高,其中OD600值提高7.2%,酶活提高2.2%。
一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因folA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因metF序列。本发明提供的提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L-5-甲基四氢叶酸原始细菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中L-5-甲基四氢叶酸累积量显著高于原始细菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗,为生物法合成L-5-甲基四氢叶酸的产业化奠定了基础。
抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明公开了抗菌肽融合细胞因子CAMPILs共表达生物制剂的制备和应用。本发明所提供的抗菌肽融合细胞因子CAMPILs为如下A1)、A2)或A3)A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质;A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明,本发明的CAMPILs可以促进淋巴细胞、红细胞和白细胞的增殖,抑制致病微生物的生长,促进非特异性抗体(IgG、IgG1、IgG2a)及疾病特异抗体的分泌,提高动物的免疫能力与存活率。
一种双质粒工程菌提高L-5-甲基四氢叶酸产量的生物方法
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明提供了一种提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和和一种L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)基因GlyA和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因MetF序列。本发明提供的提高L‑5‑甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法为,将L‑5‑甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒转化累积L‑5‑甲基四氢叶酸原始菌株,获得重组菌并发酵该重组菌。最终发酵产物中,重组菌累积的L‑5‑甲基四氢叶酸显著高于原始菌株,提高了原料利用率,降低了生产成本和能耗。
一种共表达CYP和CPR的酵母系统
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及一种用于体外药物代谢性质评价的药物代谢酶异源表达系统,具体的说一种共表达CYP和CPR的酵母表达系统,分别带有CPR的DNA片段和CYP的DNA片段的酵母表达载体转导酵母细胞中,这两个表达载体分别以整合型和游离型的方式在酵母细胞中表达,重组的酵母细胞经发酵诱导,得到的酵母细胞制备物即为目的表达系统,其可应用于CYP酶系体外药物代谢性质的评价。所构建成新的酿酒酵母共表达系统可广泛地应用于氧化还原酶体系如细胞色素P450酶系,后者被广泛地应用于涉及ADME/T和药代动力学中药物代谢等的筛选、应用和开发。