技术简介
由抗生素引起的耐药性问题成为研究热点,寻找新型绿色的替代品成为迫在眉睫的任务。抗菌肽具有小分子量,广谱抑菌性及优良的稳定性等优点,具有抗菌、抗病毒、抗癌、促进免疫调节等多种作用,在生物医药、畜牧业、农业、食品等行业都具有潜在的应用前景。对抗菌肽基因进行改造,在原氨基酸基础上增加了6个组氨酸标签以方便检测和纯化蛋白。重组后,目的基因经过热击转入酵母细胞中。通过博来霉素抗性筛选后,可获得所需高效表达重组阳性酵母菌株。以毕赤酵母作为表达载体,以甲醇为酵母唯一碳源进行诱导表达并亲和纯化,获得所需菌株。对产生的抗菌肽进行抑菌及稳定性研究,确定对金黄色葡萄球菌、大肠埃希、大肠O157、沙门氏菌和单增李斯特菌等容易引起食源性中毒的有害菌有很强的抑菌作用,并且拥有良好的稳定性。