找到24项技术成果数据。
找技术 >几个与白血病细胞耐药相关基因的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
1、应用和推广情况:这一成果在我院临床白血病和淋巴瘤的诊治过程中已广泛应用,为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;另外,浙江大学医学院第一附属医院、扬州大学附属苏北医院和枣庄中心医院等单位也使用VEGF作为白血病临床疗效和预后的判断的指标(见引用文献)。苏州大学附属一院、常州市第一人民医院等单位采用WT1作为白血病临床疗效和预后的判断的预测指标(见引用文献)。均获得较好的结果。 2、论文发表和被引用情况:4次在国际会议(ASH Meeting、中日血液学会议),10余次在全国血液学会议、全国白血病会议、全国实验血液学会议及江苏省血液学术会议上交流,引起了国内外同行专家广泛关注和充分肯定。本课题在研究过程中曾得到中国医学科学院天津血液学研究所杨纯正教授、江苏省血液病研究所陈子兴教授指导。课题组在国内外学术期刊上共发表论文49篇,37篇论文发表在核心期刊上,SCI收录论文7篇,总影响因子(IF)为23.3,中华医学系列杂志论文17篇。学术论文多次被引用,论文被引用200多次,其中他引189次,8次被高影响因子(IF>5.0)的科技论文引用,均为正面引用。研究项目共培养博、硕士研究生8名。 3、预期应用前景:一是为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;二是从基因转录调控环节探讨白血病细胞MDR产生的分子机制,寻找了新的克服MDR的作用靶点,为白血病细胞耐药的逆转和预防打下了良好的基础;三是对这些基因引起耐药的机制进行了深入的研究,这将有助于通过多步骤、多靶点控制白血病细胞的耐药形成。所以,本研究结果将对克服白血病细胞的耐药性,提高白血病治疗的缓解率,延长白血病患者的生存期具有重大意义,具有显著的社会效益和经济效益。
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用性研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用研究首次发现:1.小剂量DADS可诱导人白血病HL-60细胞分化,效果与ATRA相同。2.DADS诱导HL-60细胞分化差异基因CD11b、P21WAF1、STAT1、Calmodulin 1、PRDX2、CNOT8、PQBP1、RPS7等基因上调,PCNA、STAT3、hRRM2、CaMK、c-myc等基因下调。3.DADS诱导人白血病细胞分化的差异蛋白,galectin-10、hnRNP D0、plectin 1和TFα表达上调,DJ-1、Cofilin 1、calreticulin、LyGDI、PCNA、aldolase A、CA II、 GAPDH、Peroxiredoxin1、Peroxiredoxin3、ZFP9、AKI 2等表达下调。4.DADS诱导人白血病HL-60细胞分化的机制与抑制JAK1/STAT3通路下调STAT3与Myc核内表达水平、上调组蛋白H3、H4乙酰化水平和p21WAF1、下调calreticulin,增加CD11b与降低CD33表达和促进NBT还原能力、下调DJ-1促使DJ-1从细胞质转移到细胞核诱导分化有关。5.中等剂量DADS具有诱导凋亡作用,效果与ATRA相似。6.DADS诱导HL-60细胞凋亡相关基因发现,Fas-L、TRAF1、TRAF5、E2F6、IL8和CXCL10基因上调与Bag-1、MCL-1、Cyclin B、Cyclin C、BNIP3、Cks1p9、CUL4A、E2F-4、MCM2、MK167、DNAJA1、MRE11B、PCNA、HSPA4和HSPA9B等基因下调。7.DADS诱导白血病细胞凋亡机制与通过Chk1/CDC25C/CyclinB1/CDK1通路、抑制ERK和激活p38、活性氧介导JNK通路、MAPK和PI3K/Akt通路下调Mcl-1抑制PCNA结合或CDK1结合、MCL-1结合Bid导致MCL-1与Bax分离,启动线粒体凋亡通路和Rac2-NADPH氧化酶-ROS-JNK等多条通路有关。在国内外发表论文40篇,SCI收录13篇(总IF:34.261),被引用609篇次(总IF:569.371),他引479篇次(总IF:437.593),其中,Nal Rev Drug Discov(IF:57)、Pharmacol Rev(IF:18.964),Pharmacol Ther(IF:11.127),Semin Cancer Biol(IF:10.198)、Antioxid Redox Sign(IF:8.456),Carcinogenesis(IF:5.105),Br J Haematol(IF:5.67)等权威期刊与7部国外专著引用。
HouttuynoidE在治疗白血病药物中的应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用,属于医药领域。HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用;HouttuynoidE在制备抑制白血病细胞增殖药物中的应用,HouttuynoidE在制备诱导白血病细胞凋亡药物中的应用。HouttuynoidE通过抑制白血病细胞增殖和诱导白血病细胞凋亡,来对白血病进行治疗。对于本发明涉及的HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的用途属于首次公开,由于骨架类型属于全新的骨架类型,而且其对于白血病细胞的抑制活性强得意想不到。
小白菊内酯干预白血病细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该课题任务来源于2011年桂林市科学研究与技术开发计划项目(批准号:20110119-1-12)。该项目通过细胞培养、分子生物学实验、流式细胞仪及免疫组化等技术得到如下结果:体外实验成功分离培养Jurkat细胞、白血病原代细胞及骨髓基质细胞(BMSCs)证实PTL在5-20μmol/L时对Jurkat细胞的有显著地抑制增殖、促进凋亡作用,PTL能增强阿霉素及地塞米松对Jurkat细胞及复发难治的原代淋巴细胞白血病的增殖抑制及诱导凋亡作用,联用具有明显的协同作用。证实Adr单用组NF-κBp65的表达明显强于对照组,PTL联合Adr及Dex能明显降低Adr及Dex单药组的NF-κBp65水平,证实PTL单用及增强Adr及地塞米松抗淋巴细胞白血病的机制可能是通过抑制NF-κBp65信号通路来实现的。证实在BMSCs的环境下,PTL能抑制Jurkat细胞及原代白血病细胞的增殖,促进其凋亡;PTL能促进Jurkat细胞及原代白血病细胞G1期比例增加、S期和G2期比例减少;PTL能导致Jurkat细胞及原代白血病细胞线粒体膜电势下降;PTL能明显抑制Jurkat细胞及白血病原代细胞粘附于骨髓基质细胞的作用PTL能明显降低Jurkat细胞或及白血病原代细胞共培养模型中的粘附分子CXCR4的表达。通过对实验资料及数据整理,得出如下研究结论:复发难治性淋巴细胞白血病含有部分白血病干细胞;PTL有抗ALL作用,可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用,及可抑制白血病细胞粘附BMSCs;PTL抗白血病的作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路和改变细胞周期来抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡,还可能通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。该项目将实验数据及结果总结成文在国内外发表论文10篇,国外发表的论文被leukemiaResearch(SCI,IF=2.923)收录,国内论文均发表在国家级核心期刊,是区内最先开发研究PTL抗白血病的单位。该课题将分子生物学技术与细胞培养技术结合,从细胞学、分子生物学及整体水平对PTL抗Jurkat细胞及复发难治性白血病细胞中的作用及调控机制进行了研究,课题立题新颖,科学性强,设计合理,技术手段较先进,实验难度较大,结论可信。在项目实施过程中培养硕士研究生3名。该研究的各项性能指标均达到和超过任务合同书要求的指标,并达到预期目标。经广西医科大学图书馆查新提炼出该项目的创新点如下:该研究在国内首次证实PTL抗ALL作用;该研究在国内首次证实PTL可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用;该研究在国内外首次证实PTL可抑制白血病细胞粘附BMSCs;该研究在国内首次证实PTL抗白血病作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路、改变细胞周期及降低细胞膜电势来抑制白血病细胞增殖和促进凋亡;该研究在国内外首次证实PTL抗ALL的作用机制可以通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。将该项目结果及技术进行推广,已被右江民族医学院附属医院推广应用,取得了良好的社会效益及经济效益,有助于尽早开发、研究、应用PTL在临床上治疗复发难治性急性淋巴细胞白血病,PTL作为一种合理有效、价格适度的中药,可望发展为畅销的抗白血病药,在全社会推广应用,具有广阔的市场前景。
中药对白血病细胞相关基因、蛋白及其逆转耐药的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该项目的研究对象主要集中在白血病细胞株。课题利用MTT、细胞形态观察、流式细胞术、荧光染色、免疫荧光、核酸电泳、RT-PCR、Westernblot等方法,以及先进的基因芯片,激光共聚焦显微镜技术,检测了雄黄和槲皮素对白血病株和白血病人原代细胞的增殖、分化和凋亡的作用,以及相关基因表达的影响,雄黄作用后白血病细胞内基因表达谱的改变,以及槲皮素逆转白血病细胞耐药的效应和作用机制。实验结果显示,雄黄能抑制白血病细胞株的增殖生长,促进株凋亡;雄黄在蛋白水平调控PML基因的表达;基因芯片的检测结果显示:雄黄处理后白血病细胞内基因表达谱发生了改变,其中包括凋亡相关的基因,细胞信号转导相关基因,细胞周期相关蛋白等。
Survivin和B7-1基因对白血病细胞生物学特性的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
任务来源:山西医科大学第二医院博士启动基金(2006-14)。技术原理及性能指标:该课题选取急性白血病(AL)患者为研究对象,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓中Survivin和B7-1mRNA的表达情况,以明确Survivin和B7-1mRNA表达紊乱在AL的发病和复发中的作用;构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,纯化提取重组质粒DNA;将人全长Survivin基因真核载体Survivin-pIRES2-EGFP转染白血病K562细胞:用RT-PCR方法确定人SurvivinmRNA在K562细胞中顺利表达,并随转染时间的延长,SurvivinmRNA表达增加;将转基因后的白血病K562细胞与T淋巴细胞共同作用:用半定量RT-PCR和ELISA方法分别在基因水平和蛋白水平检测Survivin基因转染前后的K562细胞,对T淋巴细胞的CK表达情况的影响。技术的创造性与先进性:国内外关于Survivin转基因修饰的白血病疫苗的研究尚属空白。(1)该课题成功构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,并在K562细胞中顺利表达,通过转染Survivin增强白血病细胞的免疫原性,为后续建立稳定表达Survivin/B7-1的K562细胞系及白血病的靶向治疗研究奠定基础;(2)分别在基因水平和蛋白水平检测了转基因前后对T淋巴细胞细胞因子表达,以明确转染后的K562细胞对T淋巴细胞功能的影响,为今后白血病疫苗的研究工作奠定基础。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该研究为白血病疫苗的研究和白血病免疫治疗及靶向治疗提供了很好的理论依据和研究基础,使更多的白血病患者解除病痛,提高生活质量,长期生存,甚至痊愈。应用情况及存在问题:转染效率尚不稳定,应尽量将转染效率控制在较小的变化范围内;如果能与其他共刺激分子同时转染K562细胞,刺激T淋巴细胞,效果可能会更佳。
联合基因治疗抑制白血病细胞生长作用的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
本研究通过导入白血病细胞缺失、突变或表达异常的正常基因来恢复细胞正常生理过程,达到抑制白血病细胞生长的作用。本研究主要包括如下几方面:1.采用脂质体介导外源性野生型p16和p53基因转染白血病细胞株,免疫印渍及免疫细胞化学染色方法检测目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了目的基因的表达对白血病细胞的凋亡作用及促分化作用。结果发现,单独转染野生型p16或p53基因能抑制白血病细胞生长,使白血病细胞G1期细胞数增加,S期细胞减少;而当同时转染该两种基因时发现,恢复两种抑癌基因的表达能促进更多的白血病细胞的凋亡,达到更强的抑制白血病细胞生长作用的目地,并能更有效地促进白血病细胞向成熟方向分化。同时发现,与p16基因相比,p53基因显示出更强的致白血病细胞凋亡作用。2.使用血管内皮生长因子(VEGF)对白血病细胞株干预,发现VEGF一方面诱导血管生成素-2的表达,并由血管生成素-2通过激活促癌基因c-Ets1诱导金属蛋白酶而降解血管基底膜;另一方面,可直接上调肿瘤细胞的金属蛋白酶的表达,这些均有利于白血病细胞的侵袭转移。并且发现,VEGF能促进Bcl-XL蛋白表达,而使Bax收蛋白表达水平下降,通过影响Bcl-XL/Bax表达的比率,调节着caspase-3的活性,进而调节着细胞的凋亡;结果发现,VEGF对白血病细胞株具有抗凋亡作用。3.联合转染p53基因、血管生成抑素基因对白血病细胞的抑制作用:将携带野生型p53基因、血管生成抑素基因的真核表达载体转染白血病细胞,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达差异;结果表明,转染后目的基因在白血病细胞中表达,VEGF和Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达加强,联合转染p53和血管生成抑素基因对白血病细胞增殖有较强的抑制作用,且比单独转染这两种基因作用强,两者协同作用的机制可能是共同影响bcl-2、bax表达的途径。P53与血管生长抑素基因相互间促进表达,都能抑制VEGF的产生,导致VEGF表达量下降,共同抑制Bcl-2、促进Bax的表达,使白血病细胞的生长平衡倾向于凋亡。p53和p16INK4a 抑癌基因是细胞周期调节途径(p53途径和RB途径)中两个重要的成份,也是这两条途径受到损害时最易发生遗传学改变的基因之一。在血液系统肿瘤中,p53基因突变多发生于晚期,而慢粒急变、难治或复发白血病中突变率更高,可达60﹪以上。P16INK4a基因主要在淋巴系统肿瘤中发生改变,在急性淋巴细胞白血病(ALL)特别是儿童ALL中p16基因的缺失可达26﹪~75﹪,在急性髓系白血病中,缺失率很低,在慢性髓细胞白血病原始细胞危象期特别是原始淋巴细胞危象期时缺失率可达35﹪。所以,p53和p16INK4a抑癌基因较适合复发、难治急性白血病或慢粒急变白血病的基因治疗。以上研究结果表明,联合多种基因治疗,能更有效地抑制白血病细胞的生长,促进其分化及凋亡,弥补传统抗肿瘤治疗方法的缺陷。
维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立极其耐药机制研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该课题组建立维拉帕米耐药性K562(K562/VER)细胞系和阿霉素耐药性人白血病细胞系维拉帕米耐药性亚系(K562/ADM/VER)。采用MTT法测定细胞对维拉帕米的耐药性以及对潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。并建立了一种新的细胞内维拉帕米含量测定法,即高效液相法,这种方法比同位素法更敏感,而且操作简单安全,其敏感性和特异性均很高。研究维拉帕米耐药细胞亚系的相关基因表达变化,进一步探讨维拉帕米的耐药机制。该研究为研究肿瘤耐药逆转剂的耐药性及其对策开辟了道路;为肿瘤临床化疗时正常理解和合理使用耐药逆转剂提供参考,从而提高肿瘤病人的生存率。该项目对肿瘤耐药逆转剂及其调节剂的开发具有一定的应用前景。
组蛋白乙酰化对白血病细胞增殖和分化的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该研究所属科学技术领域为医药卫生领域,2008年河北省自然科学资金项目,项目编号为C2008000660,已按项目要求完成各项指标,并通过验收。主要技术内容:该研究应用丙戊酸钠体外处理t(8;21)/AML细胞株Kasumi-1细胞和原代细胞,通过运用细胞生物学、流式细胞术以及分子生物学等方法,观察丙戊酸钠对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡及血管新生的影响;该研究建立裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤模型,应用丙戊酸钠对裸鼠进行腹腔注射,运用细胞生物学、流式细胞术、免疫组织化学以及分子生物学等方法检测移植瘤组织细胞分化、凋亡和血管新生等相关指标,观察丙戊酸钠对裸鼠移植瘤的抑制作用;主要目的是探讨组蛋白乙酰化改变与白血病细胞分化和凋亡的关系,试图探寻组蛋白乙酰化改变对血管新生的影响,明确AML1-ETO融合蛋白在t(8;21)急性白血病发病中的作用,明确丙戊酸钠作为HDAC抑制剂对于t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-1细胞及裸鼠移植瘤的抗肿瘤活性和作用机制,为相关后续研究及最终应用于临床治疗血液系统恶性肿瘤提供新的理论依据。主要创新性成果:1.该研究证实了组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对于急性白血病细胞系Kasumi-1细胞增殖有抑制作用,可以诱导其分化、凋亡和抑制血管新生相关因子的表达,为丙戊酸钠临床应用提供体外实验理论依据;2.该研究建立了t(8;21)急性白血病裸鼠移植瘤模型,在国内首次明确了丙戊酸钠可以抑制移植瘤的生长,抑制移植瘤的血管新生,具有抗肿瘤的活性,填补了丙戊酸钠在动物实验中抗肿瘤活性研究的空白;3.明确了丙戊酸钠可以调控AML1靶基因GM-CSF、P21、VEGF启动子区乙酰化组蛋白H3的表达和下调组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达,证实了组蛋白乙酰化水平的变化是t(8;21)急性白血病的发生关键机制之一。推广应用及效益情况:该项目研究成果和相关实验技术与方法在承德医学院附属医院、承德市中心医院等多家单位和科研机构得到推广与应用,在体外实验和动物实验取得预期实验结果的前提下,针对于该地区难治性复发性白血病的患者,给予丙戊酸钠联合其他药物的联合化疗,取得明显的治疗效果。为白血病患者的靶向治疗提供新的治疗策略,取得明显的社会效益。该项目的研究内容已在国内权威专业期刊发表论文17篇。完成该项目共培养硕士研究生16名。推动科技进步的作用:该项目研究成果和技术方法多次被国内学者引用和借鉴,对于提高该研究领域科技水平起到了积极的推动作用,通过对丙戊酸钠抗白血病机制的研究为白血病的临床治疗和后续研究提供技术支撑和理论依据,也为靶向治疗恶性血液病提供新的方向,同时为开发研究老药新用提供新的思路。
密度梯度离心法分离白血病细胞
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
应用于白血病临床应用研究和实验血液学研究,有利于白血病等早期诊断、提高诊断率、疗效观察、缓解与复发的判定等;为实验血液学研究提供纯度高的、不同分化阶段的白血病细胞做样品,使多种研究得到理想的结果。来自白血病干细胞的白血病细胞停滞于不同分化阶段,越是幼稚的细胞其比重越低,比重相差千分之几,故应用适当的不连续密度梯度分离液可以将不同分化程度(比重不同)的白细胞及白血病细胞分离开,不仅纯度高得量多而且使少数细胞浓集易于被发现。已将患者白血病细胞分成6~9种细胞进行形态学分析,用于造血干祖细胞培养、细胞电泳等实验,取得早期诊断、疗效观察、缓解程度判定方面可靠依据。有论文发表可供参考。
找到24项技术成果数据。
找技术 >几个与白血病细胞耐药相关基因的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
1、应用和推广情况:这一成果在我院临床白血病和淋巴瘤的诊治过程中已广泛应用,为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;另外,浙江大学医学院第一附属医院、扬州大学附属苏北医院和枣庄中心医院等单位也使用VEGF作为白血病临床疗效和预后的判断的指标(见引用文献)。苏州大学附属一院、常州市第一人民医院等单位采用WT1作为白血病临床疗效和预后的判断的预测指标(见引用文献)。均获得较好的结果。 2、论文发表和被引用情况:4次在国际会议(ASH Meeting、中日血液学会议),10余次在全国血液学会议、全国白血病会议、全国实验血液学会议及江苏省血液学术会议上交流,引起了国内外同行专家广泛关注和充分肯定。本课题在研究过程中曾得到中国医学科学院天津血液学研究所杨纯正教授、江苏省血液病研究所陈子兴教授指导。课题组在国内外学术期刊上共发表论文49篇,37篇论文发表在核心期刊上,SCI收录论文7篇,总影响因子(IF)为23.3,中华医学系列杂志论文17篇。学术论文多次被引用,论文被引用200多次,其中他引189次,8次被高影响因子(IF>5.0)的科技论文引用,均为正面引用。研究项目共培养博、硕士研究生8名。 3、预期应用前景:一是为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;二是从基因转录调控环节探讨白血病细胞MDR产生的分子机制,寻找了新的克服MDR的作用靶点,为白血病细胞耐药的逆转和预防打下了良好的基础;三是对这些基因引起耐药的机制进行了深入的研究,这将有助于通过多步骤、多靶点控制白血病细胞的耐药形成。所以,本研究结果将对克服白血病细胞的耐药性,提高白血病治疗的缓解率,延长白血病患者的生存期具有重大意义,具有显著的社会效益和经济效益。
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用性研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用研究首次发现:1.小剂量DADS可诱导人白血病HL-60细胞分化,效果与ATRA相同。2.DADS诱导HL-60细胞分化差异基因CD11b、P21WAF1、STAT1、Calmodulin 1、PRDX2、CNOT8、PQBP1、RPS7等基因上调,PCNA、STAT3、hRRM2、CaMK、c-myc等基因下调。3.DADS诱导人白血病细胞分化的差异蛋白,galectin-10、hnRNP D0、plectin 1和TFα表达上调,DJ-1、Cofilin 1、calreticulin、LyGDI、PCNA、aldolase A、CA II、 GAPDH、Peroxiredoxin1、Peroxiredoxin3、ZFP9、AKI 2等表达下调。4.DADS诱导人白血病HL-60细胞分化的机制与抑制JAK1/STAT3通路下调STAT3与Myc核内表达水平、上调组蛋白H3、H4乙酰化水平和p21WAF1、下调calreticulin,增加CD11b与降低CD33表达和促进NBT还原能力、下调DJ-1促使DJ-1从细胞质转移到细胞核诱导分化有关。5.中等剂量DADS具有诱导凋亡作用,效果与ATRA相似。6.DADS诱导HL-60细胞凋亡相关基因发现,Fas-L、TRAF1、TRAF5、E2F6、IL8和CXCL10基因上调与Bag-1、MCL-1、Cyclin B、Cyclin C、BNIP3、Cks1p9、CUL4A、E2F-4、MCM2、MK167、DNAJA1、MRE11B、PCNA、HSPA4和HSPA9B等基因下调。7.DADS诱导白血病细胞凋亡机制与通过Chk1/CDC25C/CyclinB1/CDK1通路、抑制ERK和激活p38、活性氧介导JNK通路、MAPK和PI3K/Akt通路下调Mcl-1抑制PCNA结合或CDK1结合、MCL-1结合Bid导致MCL-1与Bax分离,启动线粒体凋亡通路和Rac2-NADPH氧化酶-ROS-JNK等多条通路有关。在国内外发表论文40篇,SCI收录13篇(总IF:34.261),被引用609篇次(总IF:569.371),他引479篇次(总IF:437.593),其中,Nal Rev Drug Discov(IF:57)、Pharmacol Rev(IF:18.964),Pharmacol Ther(IF:11.127),Semin Cancer Biol(IF:10.198)、Antioxid Redox Sign(IF:8.456),Carcinogenesis(IF:5.105),Br J Haematol(IF:5.67)等权威期刊与7部国外专著引用。
HouttuynoidE在治疗白血病药物中的应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用,属于医药领域。HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用;HouttuynoidE在制备抑制白血病细胞增殖药物中的应用,HouttuynoidE在制备诱导白血病细胞凋亡药物中的应用。HouttuynoidE通过抑制白血病细胞增殖和诱导白血病细胞凋亡,来对白血病进行治疗。对于本发明涉及的HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的用途属于首次公开,由于骨架类型属于全新的骨架类型,而且其对于白血病细胞的抑制活性强得意想不到。
小白菊内酯干预白血病细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该课题任务来源于2011年桂林市科学研究与技术开发计划项目(批准号:20110119-1-12)。该项目通过细胞培养、分子生物学实验、流式细胞仪及免疫组化等技术得到如下结果:体外实验成功分离培养Jurkat细胞、白血病原代细胞及骨髓基质细胞(BMSCs)证实PTL在5-20μmol/L时对Jurkat细胞的有显著地抑制增殖、促进凋亡作用,PTL能增强阿霉素及地塞米松对Jurkat细胞及复发难治的原代淋巴细胞白血病的增殖抑制及诱导凋亡作用,联用具有明显的协同作用。证实Adr单用组NF-κBp65的表达明显强于对照组,PTL联合Adr及Dex能明显降低Adr及Dex单药组的NF-κBp65水平,证实PTL单用及增强Adr及地塞米松抗淋巴细胞白血病的机制可能是通过抑制NF-κBp65信号通路来实现的。证实在BMSCs的环境下,PTL能抑制Jurkat细胞及原代白血病细胞的增殖,促进其凋亡;PTL能促进Jurkat细胞及原代白血病细胞G1期比例增加、S期和G2期比例减少;PTL能导致Jurkat细胞及原代白血病细胞线粒体膜电势下降;PTL能明显抑制Jurkat细胞及白血病原代细胞粘附于骨髓基质细胞的作用PTL能明显降低Jurkat细胞或及白血病原代细胞共培养模型中的粘附分子CXCR4的表达。通过对实验资料及数据整理,得出如下研究结论:复发难治性淋巴细胞白血病含有部分白血病干细胞;PTL有抗ALL作用,可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用,及可抑制白血病细胞粘附BMSCs;PTL抗白血病的作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路和改变细胞周期来抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡,还可能通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。该项目将实验数据及结果总结成文在国内外发表论文10篇,国外发表的论文被leukemiaResearch(SCI,IF=2.923)收录,国内论文均发表在国家级核心期刊,是区内最先开发研究PTL抗白血病的单位。该课题将分子生物学技术与细胞培养技术结合,从细胞学、分子生物学及整体水平对PTL抗Jurkat细胞及复发难治性白血病细胞中的作用及调控机制进行了研究,课题立题新颖,科学性强,设计合理,技术手段较先进,实验难度较大,结论可信。在项目实施过程中培养硕士研究生3名。该研究的各项性能指标均达到和超过任务合同书要求的指标,并达到预期目标。经广西医科大学图书馆查新提炼出该项目的创新点如下:该研究在国内首次证实PTL抗ALL作用;该研究在国内首次证实PTL可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用;该研究在国内外首次证实PTL可抑制白血病细胞粘附BMSCs;该研究在国内首次证实PTL抗白血病作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路、改变细胞周期及降低细胞膜电势来抑制白血病细胞增殖和促进凋亡;该研究在国内外首次证实PTL抗ALL的作用机制可以通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。将该项目结果及技术进行推广,已被右江民族医学院附属医院推广应用,取得了良好的社会效益及经济效益,有助于尽早开发、研究、应用PTL在临床上治疗复发难治性急性淋巴细胞白血病,PTL作为一种合理有效、价格适度的中药,可望发展为畅销的抗白血病药,在全社会推广应用,具有广阔的市场前景。
中药对白血病细胞相关基因、蛋白及其逆转耐药的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该项目的研究对象主要集中在白血病细胞株。课题利用MTT、细胞形态观察、流式细胞术、荧光染色、免疫荧光、核酸电泳、RT-PCR、Westernblot等方法,以及先进的基因芯片,激光共聚焦显微镜技术,检测了雄黄和槲皮素对白血病株和白血病人原代细胞的增殖、分化和凋亡的作用,以及相关基因表达的影响,雄黄作用后白血病细胞内基因表达谱的改变,以及槲皮素逆转白血病细胞耐药的效应和作用机制。实验结果显示,雄黄能抑制白血病细胞株的增殖生长,促进株凋亡;雄黄在蛋白水平调控PML基因的表达;基因芯片的检测结果显示:雄黄处理后白血病细胞内基因表达谱发生了改变,其中包括凋亡相关的基因,细胞信号转导相关基因,细胞周期相关蛋白等。
Survivin和B7-1基因对白血病细胞生物学特性的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
任务来源:山西医科大学第二医院博士启动基金(2006-14)。技术原理及性能指标:该课题选取急性白血病(AL)患者为研究对象,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓中Survivin和B7-1mRNA的表达情况,以明确Survivin和B7-1mRNA表达紊乱在AL的发病和复发中的作用;构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,纯化提取重组质粒DNA;将人全长Survivin基因真核载体Survivin-pIRES2-EGFP转染白血病K562细胞:用RT-PCR方法确定人SurvivinmRNA在K562细胞中顺利表达,并随转染时间的延长,SurvivinmRNA表达增加;将转基因后的白血病K562细胞与T淋巴细胞共同作用:用半定量RT-PCR和ELISA方法分别在基因水平和蛋白水平检测Survivin基因转染前后的K562细胞,对T淋巴细胞的CK表达情况的影响。技术的创造性与先进性:国内外关于Survivin转基因修饰的白血病疫苗的研究尚属空白。(1)该课题成功构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,并在K562细胞中顺利表达,通过转染Survivin增强白血病细胞的免疫原性,为后续建立稳定表达Survivin/B7-1的K562细胞系及白血病的靶向治疗研究奠定基础;(2)分别在基因水平和蛋白水平检测了转基因前后对T淋巴细胞细胞因子表达,以明确转染后的K562细胞对T淋巴细胞功能的影响,为今后白血病疫苗的研究工作奠定基础。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该研究为白血病疫苗的研究和白血病免疫治疗及靶向治疗提供了很好的理论依据和研究基础,使更多的白血病患者解除病痛,提高生活质量,长期生存,甚至痊愈。应用情况及存在问题:转染效率尚不稳定,应尽量将转染效率控制在较小的变化范围内;如果能与其他共刺激分子同时转染K562细胞,刺激T淋巴细胞,效果可能会更佳。
联合基因治疗抑制白血病细胞生长作用的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
本研究通过导入白血病细胞缺失、突变或表达异常的正常基因来恢复细胞正常生理过程,达到抑制白血病细胞生长的作用。本研究主要包括如下几方面:1.采用脂质体介导外源性野生型p16和p53基因转染白血病细胞株,免疫印渍及免疫细胞化学染色方法检测目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了目的基因的表达对白血病细胞的凋亡作用及促分化作用。结果发现,单独转染野生型p16或p53基因能抑制白血病细胞生长,使白血病细胞G1期细胞数增加,S期细胞减少;而当同时转染该两种基因时发现,恢复两种抑癌基因的表达能促进更多的白血病细胞的凋亡,达到更强的抑制白血病细胞生长作用的目地,并能更有效地促进白血病细胞向成熟方向分化。同时发现,与p16基因相比,p53基因显示出更强的致白血病细胞凋亡作用。2.使用血管内皮生长因子(VEGF)对白血病细胞株干预,发现VEGF一方面诱导血管生成素-2的表达,并由血管生成素-2通过激活促癌基因c-Ets1诱导金属蛋白酶而降解血管基底膜;另一方面,可直接上调肿瘤细胞的金属蛋白酶的表达,这些均有利于白血病细胞的侵袭转移。并且发现,VEGF能促进Bcl-XL蛋白表达,而使Bax收蛋白表达水平下降,通过影响Bcl-XL/Bax表达的比率,调节着caspase-3的活性,进而调节着细胞的凋亡;结果发现,VEGF对白血病细胞株具有抗凋亡作用。3.联合转染p53基因、血管生成抑素基因对白血病细胞的抑制作用:将携带野生型p53基因、血管生成抑素基因的真核表达载体转染白血病细胞,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达差异;结果表明,转染后目的基因在白血病细胞中表达,VEGF和Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达加强,联合转染p53和血管生成抑素基因对白血病细胞增殖有较强的抑制作用,且比单独转染这两种基因作用强,两者协同作用的机制可能是共同影响bcl-2、bax表达的途径。P53与血管生长抑素基因相互间促进表达,都能抑制VEGF的产生,导致VEGF表达量下降,共同抑制Bcl-2、促进Bax的表达,使白血病细胞的生长平衡倾向于凋亡。p53和p16INK4a 抑癌基因是细胞周期调节途径(p53途径和RB途径)中两个重要的成份,也是这两条途径受到损害时最易发生遗传学改变的基因之一。在血液系统肿瘤中,p53基因突变多发生于晚期,而慢粒急变、难治或复发白血病中突变率更高,可达60﹪以上。P16INK4a基因主要在淋巴系统肿瘤中发生改变,在急性淋巴细胞白血病(ALL)特别是儿童ALL中p16基因的缺失可达26﹪~75﹪,在急性髓系白血病中,缺失率很低,在慢性髓细胞白血病原始细胞危象期特别是原始淋巴细胞危象期时缺失率可达35﹪。所以,p53和p16INK4a抑癌基因较适合复发、难治急性白血病或慢粒急变白血病的基因治疗。以上研究结果表明,联合多种基因治疗,能更有效地抑制白血病细胞的生长,促进其分化及凋亡,弥补传统抗肿瘤治疗方法的缺陷。
维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立极其耐药机制研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该课题组建立维拉帕米耐药性K562(K562/VER)细胞系和阿霉素耐药性人白血病细胞系维拉帕米耐药性亚系(K562/ADM/VER)。采用MTT法测定细胞对维拉帕米的耐药性以及对潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。并建立了一种新的细胞内维拉帕米含量测定法,即高效液相法,这种方法比同位素法更敏感,而且操作简单安全,其敏感性和特异性均很高。研究维拉帕米耐药细胞亚系的相关基因表达变化,进一步探讨维拉帕米的耐药机制。该研究为研究肿瘤耐药逆转剂的耐药性及其对策开辟了道路;为肿瘤临床化疗时正常理解和合理使用耐药逆转剂提供参考,从而提高肿瘤病人的生存率。该项目对肿瘤耐药逆转剂及其调节剂的开发具有一定的应用前景。
组蛋白乙酰化对白血病细胞增殖和分化的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该研究所属科学技术领域为医药卫生领域,2008年河北省自然科学资金项目,项目编号为C2008000660,已按项目要求完成各项指标,并通过验收。主要技术内容:该研究应用丙戊酸钠体外处理t(8;21)/AML细胞株Kasumi-1细胞和原代细胞,通过运用细胞生物学、流式细胞术以及分子生物学等方法,观察丙戊酸钠对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡及血管新生的影响;该研究建立裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤模型,应用丙戊酸钠对裸鼠进行腹腔注射,运用细胞生物学、流式细胞术、免疫组织化学以及分子生物学等方法检测移植瘤组织细胞分化、凋亡和血管新生等相关指标,观察丙戊酸钠对裸鼠移植瘤的抑制作用;主要目的是探讨组蛋白乙酰化改变与白血病细胞分化和凋亡的关系,试图探寻组蛋白乙酰化改变对血管新生的影响,明确AML1-ETO融合蛋白在t(8;21)急性白血病发病中的作用,明确丙戊酸钠作为HDAC抑制剂对于t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-1细胞及裸鼠移植瘤的抗肿瘤活性和作用机制,为相关后续研究及最终应用于临床治疗血液系统恶性肿瘤提供新的理论依据。主要创新性成果:1.该研究证实了组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对于急性白血病细胞系Kasumi-1细胞增殖有抑制作用,可以诱导其分化、凋亡和抑制血管新生相关因子的表达,为丙戊酸钠临床应用提供体外实验理论依据;2.该研究建立了t(8;21)急性白血病裸鼠移植瘤模型,在国内首次明确了丙戊酸钠可以抑制移植瘤的生长,抑制移植瘤的血管新生,具有抗肿瘤的活性,填补了丙戊酸钠在动物实验中抗肿瘤活性研究的空白;3.明确了丙戊酸钠可以调控AML1靶基因GM-CSF、P21、VEGF启动子区乙酰化组蛋白H3的表达和下调组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达,证实了组蛋白乙酰化水平的变化是t(8;21)急性白血病的发生关键机制之一。推广应用及效益情况:该项目研究成果和相关实验技术与方法在承德医学院附属医院、承德市中心医院等多家单位和科研机构得到推广与应用,在体外实验和动物实验取得预期实验结果的前提下,针对于该地区难治性复发性白血病的患者,给予丙戊酸钠联合其他药物的联合化疗,取得明显的治疗效果。为白血病患者的靶向治疗提供新的治疗策略,取得明显的社会效益。该项目的研究内容已在国内权威专业期刊发表论文17篇。完成该项目共培养硕士研究生16名。推动科技进步的作用:该项目研究成果和技术方法多次被国内学者引用和借鉴,对于提高该研究领域科技水平起到了积极的推动作用,通过对丙戊酸钠抗白血病机制的研究为白血病的临床治疗和后续研究提供技术支撑和理论依据,也为靶向治疗恶性血液病提供新的方向,同时为开发研究老药新用提供新的思路。
密度梯度离心法分离白血病细胞
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
应用于白血病临床应用研究和实验血液学研究,有利于白血病等早期诊断、提高诊断率、疗效观察、缓解与复发的判定等;为实验血液学研究提供纯度高的、不同分化阶段的白血病细胞做样品,使多种研究得到理想的结果。来自白血病干细胞的白血病细胞停滞于不同分化阶段,越是幼稚的细胞其比重越低,比重相差千分之几,故应用适当的不连续密度梯度分离液可以将不同分化程度(比重不同)的白细胞及白血病细胞分离开,不仅纯度高得量多而且使少数细胞浓集易于被发现。已将患者白血病细胞分成6~9种细胞进行形态学分析,用于造血干祖细胞培养、细胞电泳等实验,取得早期诊断、疗效观察、缓解程度判定方面可靠依据。有论文发表可供参考。
找到24项技术成果数据。
找技术 >几个与白血病细胞耐药相关基因的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
1、应用和推广情况:这一成果在我院临床白血病和淋巴瘤的诊治过程中已广泛应用,为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;另外,浙江大学医学院第一附属医院、扬州大学附属苏北医院和枣庄中心医院等单位也使用VEGF作为白血病临床疗效和预后的判断的指标(见引用文献)。苏州大学附属一院、常州市第一人民医院等单位采用WT1作为白血病临床疗效和预后的判断的预测指标(见引用文献)。均获得较好的结果。 2、论文发表和被引用情况:4次在国际会议(ASH Meeting、中日血液学会议),10余次在全国血液学会议、全国白血病会议、全国实验血液学会议及江苏省血液学术会议上交流,引起了国内外同行专家广泛关注和充分肯定。本课题在研究过程中曾得到中国医学科学院天津血液学研究所杨纯正教授、江苏省血液病研究所陈子兴教授指导。课题组在国内外学术期刊上共发表论文49篇,37篇论文发表在核心期刊上,SCI收录论文7篇,总影响因子(IF)为23.3,中华医学系列杂志论文17篇。学术论文多次被引用,论文被引用200多次,其中他引189次,8次被高影响因子(IF>5.0)的科技论文引用,均为正面引用。研究项目共培养博、硕士研究生8名。 3、预期应用前景:一是为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;二是从基因转录调控环节探讨白血病细胞MDR产生的分子机制,寻找了新的克服MDR的作用靶点,为白血病细胞耐药的逆转和预防打下了良好的基础;三是对这些基因引起耐药的机制进行了深入的研究,这将有助于通过多步骤、多靶点控制白血病细胞的耐药形成。所以,本研究结果将对克服白血病细胞的耐药性,提高白血病治疗的缓解率,延长白血病患者的生存期具有重大意义,具有显著的社会效益和经济效益。
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用性研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用研究首次发现:1.小剂量DADS可诱导人白血病HL-60细胞分化,效果与ATRA相同。2.DADS诱导HL-60细胞分化差异基因CD11b、P21WAF1、STAT1、Calmodulin 1、PRDX2、CNOT8、PQBP1、RPS7等基因上调,PCNA、STAT3、hRRM2、CaMK、c-myc等基因下调。3.DADS诱导人白血病细胞分化的差异蛋白,galectin-10、hnRNP D0、plectin 1和TFα表达上调,DJ-1、Cofilin 1、calreticulin、LyGDI、PCNA、aldolase A、CA II、 GAPDH、Peroxiredoxin1、Peroxiredoxin3、ZFP9、AKI 2等表达下调。4.DADS诱导人白血病HL-60细胞分化的机制与抑制JAK1/STAT3通路下调STAT3与Myc核内表达水平、上调组蛋白H3、H4乙酰化水平和p21WAF1、下调calreticulin,增加CD11b与降低CD33表达和促进NBT还原能力、下调DJ-1促使DJ-1从细胞质转移到细胞核诱导分化有关。5.中等剂量DADS具有诱导凋亡作用,效果与ATRA相似。6.DADS诱导HL-60细胞凋亡相关基因发现,Fas-L、TRAF1、TRAF5、E2F6、IL8和CXCL10基因上调与Bag-1、MCL-1、Cyclin B、Cyclin C、BNIP3、Cks1p9、CUL4A、E2F-4、MCM2、MK167、DNAJA1、MRE11B、PCNA、HSPA4和HSPA9B等基因下调。7.DADS诱导白血病细胞凋亡机制与通过Chk1/CDC25C/CyclinB1/CDK1通路、抑制ERK和激活p38、活性氧介导JNK通路、MAPK和PI3K/Akt通路下调Mcl-1抑制PCNA结合或CDK1结合、MCL-1结合Bid导致MCL-1与Bax分离,启动线粒体凋亡通路和Rac2-NADPH氧化酶-ROS-JNK等多条通路有关。在国内外发表论文40篇,SCI收录13篇(总IF:34.261),被引用609篇次(总IF:569.371),他引479篇次(总IF:437.593),其中,Nal Rev Drug Discov(IF:57)、Pharmacol Rev(IF:18.964),Pharmacol Ther(IF:11.127),Semin Cancer Biol(IF:10.198)、Antioxid Redox Sign(IF:8.456),Carcinogenesis(IF:5.105),Br J Haematol(IF:5.67)等权威期刊与7部国外专著引用。
HouttuynoidE在治疗白血病药物中的应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用,属于医药领域。HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用;HouttuynoidE在制备抑制白血病细胞增殖药物中的应用,HouttuynoidE在制备诱导白血病细胞凋亡药物中的应用。HouttuynoidE通过抑制白血病细胞增殖和诱导白血病细胞凋亡,来对白血病进行治疗。对于本发明涉及的HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的用途属于首次公开,由于骨架类型属于全新的骨架类型,而且其对于白血病细胞的抑制活性强得意想不到。
小白菊内酯干预白血病细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该课题任务来源于2011年桂林市科学研究与技术开发计划项目(批准号:20110119-1-12)。该项目通过细胞培养、分子生物学实验、流式细胞仪及免疫组化等技术得到如下结果:体外实验成功分离培养Jurkat细胞、白血病原代细胞及骨髓基质细胞(BMSCs)证实PTL在5-20μmol/L时对Jurkat细胞的有显著地抑制增殖、促进凋亡作用,PTL能增强阿霉素及地塞米松对Jurkat细胞及复发难治的原代淋巴细胞白血病的增殖抑制及诱导凋亡作用,联用具有明显的协同作用。证实Adr单用组NF-κBp65的表达明显强于对照组,PTL联合Adr及Dex能明显降低Adr及Dex单药组的NF-κBp65水平,证实PTL单用及增强Adr及地塞米松抗淋巴细胞白血病的机制可能是通过抑制NF-κBp65信号通路来实现的。证实在BMSCs的环境下,PTL能抑制Jurkat细胞及原代白血病细胞的增殖,促进其凋亡;PTL能促进Jurkat细胞及原代白血病细胞G1期比例增加、S期和G2期比例减少;PTL能导致Jurkat细胞及原代白血病细胞线粒体膜电势下降;PTL能明显抑制Jurkat细胞及白血病原代细胞粘附于骨髓基质细胞的作用PTL能明显降低Jurkat细胞或及白血病原代细胞共培养模型中的粘附分子CXCR4的表达。通过对实验资料及数据整理,得出如下研究结论:复发难治性淋巴细胞白血病含有部分白血病干细胞;PTL有抗ALL作用,可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用,及可抑制白血病细胞粘附BMSCs;PTL抗白血病的作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路和改变细胞周期来抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡,还可能通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。该项目将实验数据及结果总结成文在国内外发表论文10篇,国外发表的论文被leukemiaResearch(SCI,IF=2.923)收录,国内论文均发表在国家级核心期刊,是区内最先开发研究PTL抗白血病的单位。该课题将分子生物学技术与细胞培养技术结合,从细胞学、分子生物学及整体水平对PTL抗Jurkat细胞及复发难治性白血病细胞中的作用及调控机制进行了研究,课题立题新颖,科学性强,设计合理,技术手段较先进,实验难度较大,结论可信。在项目实施过程中培养硕士研究生3名。该研究的各项性能指标均达到和超过任务合同书要求的指标,并达到预期目标。经广西医科大学图书馆查新提炼出该项目的创新点如下:该研究在国内首次证实PTL抗ALL作用;该研究在国内首次证实PTL可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用;该研究在国内外首次证实PTL可抑制白血病细胞粘附BMSCs;该研究在国内首次证实PTL抗白血病作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路、改变细胞周期及降低细胞膜电势来抑制白血病细胞增殖和促进凋亡;该研究在国内外首次证实PTL抗ALL的作用机制可以通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。将该项目结果及技术进行推广,已被右江民族医学院附属医院推广应用,取得了良好的社会效益及经济效益,有助于尽早开发、研究、应用PTL在临床上治疗复发难治性急性淋巴细胞白血病,PTL作为一种合理有效、价格适度的中药,可望发展为畅销的抗白血病药,在全社会推广应用,具有广阔的市场前景。
中药对白血病细胞相关基因、蛋白及其逆转耐药的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该项目的研究对象主要集中在白血病细胞株。课题利用MTT、细胞形态观察、流式细胞术、荧光染色、免疫荧光、核酸电泳、RT-PCR、Westernblot等方法,以及先进的基因芯片,激光共聚焦显微镜技术,检测了雄黄和槲皮素对白血病株和白血病人原代细胞的增殖、分化和凋亡的作用,以及相关基因表达的影响,雄黄作用后白血病细胞内基因表达谱的改变,以及槲皮素逆转白血病细胞耐药的效应和作用机制。实验结果显示,雄黄能抑制白血病细胞株的增殖生长,促进株凋亡;雄黄在蛋白水平调控PML基因的表达;基因芯片的检测结果显示:雄黄处理后白血病细胞内基因表达谱发生了改变,其中包括凋亡相关的基因,细胞信号转导相关基因,细胞周期相关蛋白等。
Survivin和B7-1基因对白血病细胞生物学特性的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
任务来源:山西医科大学第二医院博士启动基金(2006-14)。技术原理及性能指标:该课题选取急性白血病(AL)患者为研究对象,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓中Survivin和B7-1mRNA的表达情况,以明确Survivin和B7-1mRNA表达紊乱在AL的发病和复发中的作用;构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,纯化提取重组质粒DNA;将人全长Survivin基因真核载体Survivin-pIRES2-EGFP转染白血病K562细胞:用RT-PCR方法确定人SurvivinmRNA在K562细胞中顺利表达,并随转染时间的延长,SurvivinmRNA表达增加;将转基因后的白血病K562细胞与T淋巴细胞共同作用:用半定量RT-PCR和ELISA方法分别在基因水平和蛋白水平检测Survivin基因转染前后的K562细胞,对T淋巴细胞的CK表达情况的影响。技术的创造性与先进性:国内外关于Survivin转基因修饰的白血病疫苗的研究尚属空白。(1)该课题成功构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,并在K562细胞中顺利表达,通过转染Survivin增强白血病细胞的免疫原性,为后续建立稳定表达Survivin/B7-1的K562细胞系及白血病的靶向治疗研究奠定基础;(2)分别在基因水平和蛋白水平检测了转基因前后对T淋巴细胞细胞因子表达,以明确转染后的K562细胞对T淋巴细胞功能的影响,为今后白血病疫苗的研究工作奠定基础。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该研究为白血病疫苗的研究和白血病免疫治疗及靶向治疗提供了很好的理论依据和研究基础,使更多的白血病患者解除病痛,提高生活质量,长期生存,甚至痊愈。应用情况及存在问题:转染效率尚不稳定,应尽量将转染效率控制在较小的变化范围内;如果能与其他共刺激分子同时转染K562细胞,刺激T淋巴细胞,效果可能会更佳。
联合基因治疗抑制白血病细胞生长作用的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
本研究通过导入白血病细胞缺失、突变或表达异常的正常基因来恢复细胞正常生理过程,达到抑制白血病细胞生长的作用。本研究主要包括如下几方面:1.采用脂质体介导外源性野生型p16和p53基因转染白血病细胞株,免疫印渍及免疫细胞化学染色方法检测目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了目的基因的表达对白血病细胞的凋亡作用及促分化作用。结果发现,单独转染野生型p16或p53基因能抑制白血病细胞生长,使白血病细胞G1期细胞数增加,S期细胞减少;而当同时转染该两种基因时发现,恢复两种抑癌基因的表达能促进更多的白血病细胞的凋亡,达到更强的抑制白血病细胞生长作用的目地,并能更有效地促进白血病细胞向成熟方向分化。同时发现,与p16基因相比,p53基因显示出更强的致白血病细胞凋亡作用。2.使用血管内皮生长因子(VEGF)对白血病细胞株干预,发现VEGF一方面诱导血管生成素-2的表达,并由血管生成素-2通过激活促癌基因c-Ets1诱导金属蛋白酶而降解血管基底膜;另一方面,可直接上调肿瘤细胞的金属蛋白酶的表达,这些均有利于白血病细胞的侵袭转移。并且发现,VEGF能促进Bcl-XL蛋白表达,而使Bax收蛋白表达水平下降,通过影响Bcl-XL/Bax表达的比率,调节着caspase-3的活性,进而调节着细胞的凋亡;结果发现,VEGF对白血病细胞株具有抗凋亡作用。3.联合转染p53基因、血管生成抑素基因对白血病细胞的抑制作用:将携带野生型p53基因、血管生成抑素基因的真核表达载体转染白血病细胞,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达差异;结果表明,转染后目的基因在白血病细胞中表达,VEGF和Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达加强,联合转染p53和血管生成抑素基因对白血病细胞增殖有较强的抑制作用,且比单独转染这两种基因作用强,两者协同作用的机制可能是共同影响bcl-2、bax表达的途径。P53与血管生长抑素基因相互间促进表达,都能抑制VEGF的产生,导致VEGF表达量下降,共同抑制Bcl-2、促进Bax的表达,使白血病细胞的生长平衡倾向于凋亡。p53和p16INK4a 抑癌基因是细胞周期调节途径(p53途径和RB途径)中两个重要的成份,也是这两条途径受到损害时最易发生遗传学改变的基因之一。在血液系统肿瘤中,p53基因突变多发生于晚期,而慢粒急变、难治或复发白血病中突变率更高,可达60﹪以上。P16INK4a基因主要在淋巴系统肿瘤中发生改变,在急性淋巴细胞白血病(ALL)特别是儿童ALL中p16基因的缺失可达26﹪~75﹪,在急性髓系白血病中,缺失率很低,在慢性髓细胞白血病原始细胞危象期特别是原始淋巴细胞危象期时缺失率可达35﹪。所以,p53和p16INK4a抑癌基因较适合复发、难治急性白血病或慢粒急变白血病的基因治疗。以上研究结果表明,联合多种基因治疗,能更有效地抑制白血病细胞的生长,促进其分化及凋亡,弥补传统抗肿瘤治疗方法的缺陷。
维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立极其耐药机制研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该课题组建立维拉帕米耐药性K562(K562/VER)细胞系和阿霉素耐药性人白血病细胞系维拉帕米耐药性亚系(K562/ADM/VER)。采用MTT法测定细胞对维拉帕米的耐药性以及对潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。并建立了一种新的细胞内维拉帕米含量测定法,即高效液相法,这种方法比同位素法更敏感,而且操作简单安全,其敏感性和特异性均很高。研究维拉帕米耐药细胞亚系的相关基因表达变化,进一步探讨维拉帕米的耐药机制。该研究为研究肿瘤耐药逆转剂的耐药性及其对策开辟了道路;为肿瘤临床化疗时正常理解和合理使用耐药逆转剂提供参考,从而提高肿瘤病人的生存率。该项目对肿瘤耐药逆转剂及其调节剂的开发具有一定的应用前景。
组蛋白乙酰化对白血病细胞增殖和分化的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该研究所属科学技术领域为医药卫生领域,2008年河北省自然科学资金项目,项目编号为C2008000660,已按项目要求完成各项指标,并通过验收。主要技术内容:该研究应用丙戊酸钠体外处理t(8;21)/AML细胞株Kasumi-1细胞和原代细胞,通过运用细胞生物学、流式细胞术以及分子生物学等方法,观察丙戊酸钠对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡及血管新生的影响;该研究建立裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤模型,应用丙戊酸钠对裸鼠进行腹腔注射,运用细胞生物学、流式细胞术、免疫组织化学以及分子生物学等方法检测移植瘤组织细胞分化、凋亡和血管新生等相关指标,观察丙戊酸钠对裸鼠移植瘤的抑制作用;主要目的是探讨组蛋白乙酰化改变与白血病细胞分化和凋亡的关系,试图探寻组蛋白乙酰化改变对血管新生的影响,明确AML1-ETO融合蛋白在t(8;21)急性白血病发病中的作用,明确丙戊酸钠作为HDAC抑制剂对于t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-1细胞及裸鼠移植瘤的抗肿瘤活性和作用机制,为相关后续研究及最终应用于临床治疗血液系统恶性肿瘤提供新的理论依据。主要创新性成果:1.该研究证实了组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对于急性白血病细胞系Kasumi-1细胞增殖有抑制作用,可以诱导其分化、凋亡和抑制血管新生相关因子的表达,为丙戊酸钠临床应用提供体外实验理论依据;2.该研究建立了t(8;21)急性白血病裸鼠移植瘤模型,在国内首次明确了丙戊酸钠可以抑制移植瘤的生长,抑制移植瘤的血管新生,具有抗肿瘤的活性,填补了丙戊酸钠在动物实验中抗肿瘤活性研究的空白;3.明确了丙戊酸钠可以调控AML1靶基因GM-CSF、P21、VEGF启动子区乙酰化组蛋白H3的表达和下调组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达,证实了组蛋白乙酰化水平的变化是t(8;21)急性白血病的发生关键机制之一。推广应用及效益情况:该项目研究成果和相关实验技术与方法在承德医学院附属医院、承德市中心医院等多家单位和科研机构得到推广与应用,在体外实验和动物实验取得预期实验结果的前提下,针对于该地区难治性复发性白血病的患者,给予丙戊酸钠联合其他药物的联合化疗,取得明显的治疗效果。为白血病患者的靶向治疗提供新的治疗策略,取得明显的社会效益。该项目的研究内容已在国内权威专业期刊发表论文17篇。完成该项目共培养硕士研究生16名。推动科技进步的作用:该项目研究成果和技术方法多次被国内学者引用和借鉴,对于提高该研究领域科技水平起到了积极的推动作用,通过对丙戊酸钠抗白血病机制的研究为白血病的临床治疗和后续研究提供技术支撑和理论依据,也为靶向治疗恶性血液病提供新的方向,同时为开发研究老药新用提供新的思路。
密度梯度离心法分离白血病细胞
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
应用于白血病临床应用研究和实验血液学研究,有利于白血病等早期诊断、提高诊断率、疗效观察、缓解与复发的判定等;为实验血液学研究提供纯度高的、不同分化阶段的白血病细胞做样品,使多种研究得到理想的结果。来自白血病干细胞的白血病细胞停滞于不同分化阶段,越是幼稚的细胞其比重越低,比重相差千分之几,故应用适当的不连续密度梯度分离液可以将不同分化程度(比重不同)的白细胞及白血病细胞分离开,不仅纯度高得量多而且使少数细胞浓集易于被发现。已将患者白血病细胞分成6~9种细胞进行形态学分析,用于造血干祖细胞培养、细胞电泳等实验,取得早期诊断、疗效观察、缓解程度判定方面可靠依据。有论文发表可供参考。
找到24项技术成果数据。
找技术 >几个与白血病细胞耐药相关基因的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
1、应用和推广情况:这一成果在我院临床白血病和淋巴瘤的诊治过程中已广泛应用,为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;另外,浙江大学医学院第一附属医院、扬州大学附属苏北医院和枣庄中心医院等单位也使用VEGF作为白血病临床疗效和预后的判断的指标(见引用文献)。苏州大学附属一院、常州市第一人民医院等单位采用WT1作为白血病临床疗效和预后的判断的预测指标(见引用文献)。均获得较好的结果。 2、论文发表和被引用情况:4次在国际会议(ASH Meeting、中日血液学会议),10余次在全国血液学会议、全国白血病会议、全国实验血液学会议及江苏省血液学术会议上交流,引起了国内外同行专家广泛关注和充分肯定。本课题在研究过程中曾得到中国医学科学院天津血液学研究所杨纯正教授、江苏省血液病研究所陈子兴教授指导。课题组在国内外学术期刊上共发表论文49篇,37篇论文发表在核心期刊上,SCI收录论文7篇,总影响因子(IF)为23.3,中华医学系列杂志论文17篇。学术论文多次被引用,论文被引用200多次,其中他引189次,8次被高影响因子(IF>5.0)的科技论文引用,均为正面引用。研究项目共培养博、硕士研究生8名。 3、预期应用前景:一是为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;二是从基因转录调控环节探讨白血病细胞MDR产生的分子机制,寻找了新的克服MDR的作用靶点,为白血病细胞耐药的逆转和预防打下了良好的基础;三是对这些基因引起耐药的机制进行了深入的研究,这将有助于通过多步骤、多靶点控制白血病细胞的耐药形成。所以,本研究结果将对克服白血病细胞的耐药性,提高白血病治疗的缓解率,延长白血病患者的生存期具有重大意义,具有显著的社会效益和经济效益。
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用性研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用研究首次发现:1.小剂量DADS可诱导人白血病HL-60细胞分化,效果与ATRA相同。2.DADS诱导HL-60细胞分化差异基因CD11b、P21WAF1、STAT1、Calmodulin 1、PRDX2、CNOT8、PQBP1、RPS7等基因上调,PCNA、STAT3、hRRM2、CaMK、c-myc等基因下调。3.DADS诱导人白血病细胞分化的差异蛋白,galectin-10、hnRNP D0、plectin 1和TFα表达上调,DJ-1、Cofilin 1、calreticulin、LyGDI、PCNA、aldolase A、CA II、 GAPDH、Peroxiredoxin1、Peroxiredoxin3、ZFP9、AKI 2等表达下调。4.DADS诱导人白血病HL-60细胞分化的机制与抑制JAK1/STAT3通路下调STAT3与Myc核内表达水平、上调组蛋白H3、H4乙酰化水平和p21WAF1、下调calreticulin,增加CD11b与降低CD33表达和促进NBT还原能力、下调DJ-1促使DJ-1从细胞质转移到细胞核诱导分化有关。5.中等剂量DADS具有诱导凋亡作用,效果与ATRA相似。6.DADS诱导HL-60细胞凋亡相关基因发现,Fas-L、TRAF1、TRAF5、E2F6、IL8和CXCL10基因上调与Bag-1、MCL-1、Cyclin B、Cyclin C、BNIP3、Cks1p9、CUL4A、E2F-4、MCM2、MK167、DNAJA1、MRE11B、PCNA、HSPA4和HSPA9B等基因下调。7.DADS诱导白血病细胞凋亡机制与通过Chk1/CDC25C/CyclinB1/CDK1通路、抑制ERK和激活p38、活性氧介导JNK通路、MAPK和PI3K/Akt通路下调Mcl-1抑制PCNA结合或CDK1结合、MCL-1结合Bid导致MCL-1与Bax分离,启动线粒体凋亡通路和Rac2-NADPH氧化酶-ROS-JNK等多条通路有关。在国内外发表论文40篇,SCI收录13篇(总IF:34.261),被引用609篇次(总IF:569.371),他引479篇次(总IF:437.593),其中,Nal Rev Drug Discov(IF:57)、Pharmacol Rev(IF:18.964),Pharmacol Ther(IF:11.127),Semin Cancer Biol(IF:10.198)、Antioxid Redox Sign(IF:8.456),Carcinogenesis(IF:5.105),Br J Haematol(IF:5.67)等权威期刊与7部国外专著引用。
HouttuynoidE在治疗白血病药物中的应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用,属于医药领域。HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用;HouttuynoidE在制备抑制白血病细胞增殖药物中的应用,HouttuynoidE在制备诱导白血病细胞凋亡药物中的应用。HouttuynoidE通过抑制白血病细胞增殖和诱导白血病细胞凋亡,来对白血病进行治疗。对于本发明涉及的HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的用途属于首次公开,由于骨架类型属于全新的骨架类型,而且其对于白血病细胞的抑制活性强得意想不到。
小白菊内酯干预白血病细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该课题任务来源于2011年桂林市科学研究与技术开发计划项目(批准号:20110119-1-12)。该项目通过细胞培养、分子生物学实验、流式细胞仪及免疫组化等技术得到如下结果:体外实验成功分离培养Jurkat细胞、白血病原代细胞及骨髓基质细胞(BMSCs)证实PTL在5-20μmol/L时对Jurkat细胞的有显著地抑制增殖、促进凋亡作用,PTL能增强阿霉素及地塞米松对Jurkat细胞及复发难治的原代淋巴细胞白血病的增殖抑制及诱导凋亡作用,联用具有明显的协同作用。证实Adr单用组NF-κBp65的表达明显强于对照组,PTL联合Adr及Dex能明显降低Adr及Dex单药组的NF-κBp65水平,证实PTL单用及增强Adr及地塞米松抗淋巴细胞白血病的机制可能是通过抑制NF-κBp65信号通路来实现的。证实在BMSCs的环境下,PTL能抑制Jurkat细胞及原代白血病细胞的增殖,促进其凋亡;PTL能促进Jurkat细胞及原代白血病细胞G1期比例增加、S期和G2期比例减少;PTL能导致Jurkat细胞及原代白血病细胞线粒体膜电势下降;PTL能明显抑制Jurkat细胞及白血病原代细胞粘附于骨髓基质细胞的作用PTL能明显降低Jurkat细胞或及白血病原代细胞共培养模型中的粘附分子CXCR4的表达。通过对实验资料及数据整理,得出如下研究结论:复发难治性淋巴细胞白血病含有部分白血病干细胞;PTL有抗ALL作用,可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用,及可抑制白血病细胞粘附BMSCs;PTL抗白血病的作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路和改变细胞周期来抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡,还可能通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。该项目将实验数据及结果总结成文在国内外发表论文10篇,国外发表的论文被leukemiaResearch(SCI,IF=2.923)收录,国内论文均发表在国家级核心期刊,是区内最先开发研究PTL抗白血病的单位。该课题将分子生物学技术与细胞培养技术结合,从细胞学、分子生物学及整体水平对PTL抗Jurkat细胞及复发难治性白血病细胞中的作用及调控机制进行了研究,课题立题新颖,科学性强,设计合理,技术手段较先进,实验难度较大,结论可信。在项目实施过程中培养硕士研究生3名。该研究的各项性能指标均达到和超过任务合同书要求的指标,并达到预期目标。经广西医科大学图书馆查新提炼出该项目的创新点如下:该研究在国内首次证实PTL抗ALL作用;该研究在国内首次证实PTL可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用;该研究在国内外首次证实PTL可抑制白血病细胞粘附BMSCs;该研究在国内首次证实PTL抗白血病作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路、改变细胞周期及降低细胞膜电势来抑制白血病细胞增殖和促进凋亡;该研究在国内外首次证实PTL抗ALL的作用机制可以通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。将该项目结果及技术进行推广,已被右江民族医学院附属医院推广应用,取得了良好的社会效益及经济效益,有助于尽早开发、研究、应用PTL在临床上治疗复发难治性急性淋巴细胞白血病,PTL作为一种合理有效、价格适度的中药,可望发展为畅销的抗白血病药,在全社会推广应用,具有广阔的市场前景。
中药对白血病细胞相关基因、蛋白及其逆转耐药的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该项目的研究对象主要集中在白血病细胞株。课题利用MTT、细胞形态观察、流式细胞术、荧光染色、免疫荧光、核酸电泳、RT-PCR、Westernblot等方法,以及先进的基因芯片,激光共聚焦显微镜技术,检测了雄黄和槲皮素对白血病株和白血病人原代细胞的增殖、分化和凋亡的作用,以及相关基因表达的影响,雄黄作用后白血病细胞内基因表达谱的改变,以及槲皮素逆转白血病细胞耐药的效应和作用机制。实验结果显示,雄黄能抑制白血病细胞株的增殖生长,促进株凋亡;雄黄在蛋白水平调控PML基因的表达;基因芯片的检测结果显示:雄黄处理后白血病细胞内基因表达谱发生了改变,其中包括凋亡相关的基因,细胞信号转导相关基因,细胞周期相关蛋白等。
Survivin和B7-1基因对白血病细胞生物学特性的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
任务来源:山西医科大学第二医院博士启动基金(2006-14)。技术原理及性能指标:该课题选取急性白血病(AL)患者为研究对象,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓中Survivin和B7-1mRNA的表达情况,以明确Survivin和B7-1mRNA表达紊乱在AL的发病和复发中的作用;构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,纯化提取重组质粒DNA;将人全长Survivin基因真核载体Survivin-pIRES2-EGFP转染白血病K562细胞:用RT-PCR方法确定人SurvivinmRNA在K562细胞中顺利表达,并随转染时间的延长,SurvivinmRNA表达增加;将转基因后的白血病K562细胞与T淋巴细胞共同作用:用半定量RT-PCR和ELISA方法分别在基因水平和蛋白水平检测Survivin基因转染前后的K562细胞,对T淋巴细胞的CK表达情况的影响。技术的创造性与先进性:国内外关于Survivin转基因修饰的白血病疫苗的研究尚属空白。(1)该课题成功构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,并在K562细胞中顺利表达,通过转染Survivin增强白血病细胞的免疫原性,为后续建立稳定表达Survivin/B7-1的K562细胞系及白血病的靶向治疗研究奠定基础;(2)分别在基因水平和蛋白水平检测了转基因前后对T淋巴细胞细胞因子表达,以明确转染后的K562细胞对T淋巴细胞功能的影响,为今后白血病疫苗的研究工作奠定基础。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该研究为白血病疫苗的研究和白血病免疫治疗及靶向治疗提供了很好的理论依据和研究基础,使更多的白血病患者解除病痛,提高生活质量,长期生存,甚至痊愈。应用情况及存在问题:转染效率尚不稳定,应尽量将转染效率控制在较小的变化范围内;如果能与其他共刺激分子同时转染K562细胞,刺激T淋巴细胞,效果可能会更佳。
联合基因治疗抑制白血病细胞生长作用的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
本研究通过导入白血病细胞缺失、突变或表达异常的正常基因来恢复细胞正常生理过程,达到抑制白血病细胞生长的作用。本研究主要包括如下几方面:1.采用脂质体介导外源性野生型p16和p53基因转染白血病细胞株,免疫印渍及免疫细胞化学染色方法检测目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了目的基因的表达对白血病细胞的凋亡作用及促分化作用。结果发现,单独转染野生型p16或p53基因能抑制白血病细胞生长,使白血病细胞G1期细胞数增加,S期细胞减少;而当同时转染该两种基因时发现,恢复两种抑癌基因的表达能促进更多的白血病细胞的凋亡,达到更强的抑制白血病细胞生长作用的目地,并能更有效地促进白血病细胞向成熟方向分化。同时发现,与p16基因相比,p53基因显示出更强的致白血病细胞凋亡作用。2.使用血管内皮生长因子(VEGF)对白血病细胞株干预,发现VEGF一方面诱导血管生成素-2的表达,并由血管生成素-2通过激活促癌基因c-Ets1诱导金属蛋白酶而降解血管基底膜;另一方面,可直接上调肿瘤细胞的金属蛋白酶的表达,这些均有利于白血病细胞的侵袭转移。并且发现,VEGF能促进Bcl-XL蛋白表达,而使Bax收蛋白表达水平下降,通过影响Bcl-XL/Bax表达的比率,调节着caspase-3的活性,进而调节着细胞的凋亡;结果发现,VEGF对白血病细胞株具有抗凋亡作用。3.联合转染p53基因、血管生成抑素基因对白血病细胞的抑制作用:将携带野生型p53基因、血管生成抑素基因的真核表达载体转染白血病细胞,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达差异;结果表明,转染后目的基因在白血病细胞中表达,VEGF和Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达加强,联合转染p53和血管生成抑素基因对白血病细胞增殖有较强的抑制作用,且比单独转染这两种基因作用强,两者协同作用的机制可能是共同影响bcl-2、bax表达的途径。P53与血管生长抑素基因相互间促进表达,都能抑制VEGF的产生,导致VEGF表达量下降,共同抑制Bcl-2、促进Bax的表达,使白血病细胞的生长平衡倾向于凋亡。p53和p16INK4a 抑癌基因是细胞周期调节途径(p53途径和RB途径)中两个重要的成份,也是这两条途径受到损害时最易发生遗传学改变的基因之一。在血液系统肿瘤中,p53基因突变多发生于晚期,而慢粒急变、难治或复发白血病中突变率更高,可达60﹪以上。P16INK4a基因主要在淋巴系统肿瘤中发生改变,在急性淋巴细胞白血病(ALL)特别是儿童ALL中p16基因的缺失可达26﹪~75﹪,在急性髓系白血病中,缺失率很低,在慢性髓细胞白血病原始细胞危象期特别是原始淋巴细胞危象期时缺失率可达35﹪。所以,p53和p16INK4a抑癌基因较适合复发、难治急性白血病或慢粒急变白血病的基因治疗。以上研究结果表明,联合多种基因治疗,能更有效地抑制白血病细胞的生长,促进其分化及凋亡,弥补传统抗肿瘤治疗方法的缺陷。
维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立极其耐药机制研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该课题组建立维拉帕米耐药性K562(K562/VER)细胞系和阿霉素耐药性人白血病细胞系维拉帕米耐药性亚系(K562/ADM/VER)。采用MTT法测定细胞对维拉帕米的耐药性以及对潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。并建立了一种新的细胞内维拉帕米含量测定法,即高效液相法,这种方法比同位素法更敏感,而且操作简单安全,其敏感性和特异性均很高。研究维拉帕米耐药细胞亚系的相关基因表达变化,进一步探讨维拉帕米的耐药机制。该研究为研究肿瘤耐药逆转剂的耐药性及其对策开辟了道路;为肿瘤临床化疗时正常理解和合理使用耐药逆转剂提供参考,从而提高肿瘤病人的生存率。该项目对肿瘤耐药逆转剂及其调节剂的开发具有一定的应用前景。
组蛋白乙酰化对白血病细胞增殖和分化的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该研究所属科学技术领域为医药卫生领域,2008年河北省自然科学资金项目,项目编号为C2008000660,已按项目要求完成各项指标,并通过验收。主要技术内容:该研究应用丙戊酸钠体外处理t(8;21)/AML细胞株Kasumi-1细胞和原代细胞,通过运用细胞生物学、流式细胞术以及分子生物学等方法,观察丙戊酸钠对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡及血管新生的影响;该研究建立裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤模型,应用丙戊酸钠对裸鼠进行腹腔注射,运用细胞生物学、流式细胞术、免疫组织化学以及分子生物学等方法检测移植瘤组织细胞分化、凋亡和血管新生等相关指标,观察丙戊酸钠对裸鼠移植瘤的抑制作用;主要目的是探讨组蛋白乙酰化改变与白血病细胞分化和凋亡的关系,试图探寻组蛋白乙酰化改变对血管新生的影响,明确AML1-ETO融合蛋白在t(8;21)急性白血病发病中的作用,明确丙戊酸钠作为HDAC抑制剂对于t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-1细胞及裸鼠移植瘤的抗肿瘤活性和作用机制,为相关后续研究及最终应用于临床治疗血液系统恶性肿瘤提供新的理论依据。主要创新性成果:1.该研究证实了组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对于急性白血病细胞系Kasumi-1细胞增殖有抑制作用,可以诱导其分化、凋亡和抑制血管新生相关因子的表达,为丙戊酸钠临床应用提供体外实验理论依据;2.该研究建立了t(8;21)急性白血病裸鼠移植瘤模型,在国内首次明确了丙戊酸钠可以抑制移植瘤的生长,抑制移植瘤的血管新生,具有抗肿瘤的活性,填补了丙戊酸钠在动物实验中抗肿瘤活性研究的空白;3.明确了丙戊酸钠可以调控AML1靶基因GM-CSF、P21、VEGF启动子区乙酰化组蛋白H3的表达和下调组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达,证实了组蛋白乙酰化水平的变化是t(8;21)急性白血病的发生关键机制之一。推广应用及效益情况:该项目研究成果和相关实验技术与方法在承德医学院附属医院、承德市中心医院等多家单位和科研机构得到推广与应用,在体外实验和动物实验取得预期实验结果的前提下,针对于该地区难治性复发性白血病的患者,给予丙戊酸钠联合其他药物的联合化疗,取得明显的治疗效果。为白血病患者的靶向治疗提供新的治疗策略,取得明显的社会效益。该项目的研究内容已在国内权威专业期刊发表论文17篇。完成该项目共培养硕士研究生16名。推动科技进步的作用:该项目研究成果和技术方法多次被国内学者引用和借鉴,对于提高该研究领域科技水平起到了积极的推动作用,通过对丙戊酸钠抗白血病机制的研究为白血病的临床治疗和后续研究提供技术支撑和理论依据,也为靶向治疗恶性血液病提供新的方向,同时为开发研究老药新用提供新的思路。
密度梯度离心法分离白血病细胞
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
应用于白血病临床应用研究和实验血液学研究,有利于白血病等早期诊断、提高诊断率、疗效观察、缓解与复发的判定等;为实验血液学研究提供纯度高的、不同分化阶段的白血病细胞做样品,使多种研究得到理想的结果。来自白血病干细胞的白血病细胞停滞于不同分化阶段,越是幼稚的细胞其比重越低,比重相差千分之几,故应用适当的不连续密度梯度分离液可以将不同分化程度(比重不同)的白细胞及白血病细胞分离开,不仅纯度高得量多而且使少数细胞浓集易于被发现。已将患者白血病细胞分成6~9种细胞进行形态学分析,用于造血干祖细胞培养、细胞电泳等实验,取得早期诊断、疗效观察、缓解程度判定方面可靠依据。有论文发表可供参考。
找到24项技术成果数据。
找技术 >几个与白血病细胞耐药相关基因的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
1、应用和推广情况:这一成果在我院临床白血病和淋巴瘤的诊治过程中已广泛应用,为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;另外,浙江大学医学院第一附属医院、扬州大学附属苏北医院和枣庄中心医院等单位也使用VEGF作为白血病临床疗效和预后的判断的指标(见引用文献)。苏州大学附属一院、常州市第一人民医院等单位采用WT1作为白血病临床疗效和预后的判断的预测指标(见引用文献)。均获得较好的结果。 2、论文发表和被引用情况:4次在国际会议(ASH Meeting、中日血液学会议),10余次在全国血液学会议、全国白血病会议、全国实验血液学会议及江苏省血液学术会议上交流,引起了国内外同行专家广泛关注和充分肯定。本课题在研究过程中曾得到中国医学科学院天津血液学研究所杨纯正教授、江苏省血液病研究所陈子兴教授指导。课题组在国内外学术期刊上共发表论文49篇,37篇论文发表在核心期刊上,SCI收录论文7篇,总影响因子(IF)为23.3,中华医学系列杂志论文17篇。学术论文多次被引用,论文被引用200多次,其中他引189次,8次被高影响因子(IF>5.0)的科技论文引用,均为正面引用。研究项目共培养博、硕士研究生8名。 3、预期应用前景:一是为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;二是从基因转录调控环节探讨白血病细胞MDR产生的分子机制,寻找了新的克服MDR的作用靶点,为白血病细胞耐药的逆转和预防打下了良好的基础;三是对这些基因引起耐药的机制进行了深入的研究,这将有助于通过多步骤、多靶点控制白血病细胞的耐药形成。所以,本研究结果将对克服白血病细胞的耐药性,提高白血病治疗的缓解率,延长白血病患者的生存期具有重大意义,具有显著的社会效益和经济效益。
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用性研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用研究首次发现:1.小剂量DADS可诱导人白血病HL-60细胞分化,效果与ATRA相同。2.DADS诱导HL-60细胞分化差异基因CD11b、P21WAF1、STAT1、Calmodulin 1、PRDX2、CNOT8、PQBP1、RPS7等基因上调,PCNA、STAT3、hRRM2、CaMK、c-myc等基因下调。3.DADS诱导人白血病细胞分化的差异蛋白,galectin-10、hnRNP D0、plectin 1和TFα表达上调,DJ-1、Cofilin 1、calreticulin、LyGDI、PCNA、aldolase A、CA II、 GAPDH、Peroxiredoxin1、Peroxiredoxin3、ZFP9、AKI 2等表达下调。4.DADS诱导人白血病HL-60细胞分化的机制与抑制JAK1/STAT3通路下调STAT3与Myc核内表达水平、上调组蛋白H3、H4乙酰化水平和p21WAF1、下调calreticulin,增加CD11b与降低CD33表达和促进NBT还原能力、下调DJ-1促使DJ-1从细胞质转移到细胞核诱导分化有关。5.中等剂量DADS具有诱导凋亡作用,效果与ATRA相似。6.DADS诱导HL-60细胞凋亡相关基因发现,Fas-L、TRAF1、TRAF5、E2F6、IL8和CXCL10基因上调与Bag-1、MCL-1、Cyclin B、Cyclin C、BNIP3、Cks1p9、CUL4A、E2F-4、MCM2、MK167、DNAJA1、MRE11B、PCNA、HSPA4和HSPA9B等基因下调。7.DADS诱导白血病细胞凋亡机制与通过Chk1/CDC25C/CyclinB1/CDK1通路、抑制ERK和激活p38、活性氧介导JNK通路、MAPK和PI3K/Akt通路下调Mcl-1抑制PCNA结合或CDK1结合、MCL-1结合Bid导致MCL-1与Bax分离,启动线粒体凋亡通路和Rac2-NADPH氧化酶-ROS-JNK等多条通路有关。在国内外发表论文40篇,SCI收录13篇(总IF:34.261),被引用609篇次(总IF:569.371),他引479篇次(总IF:437.593),其中,Nal Rev Drug Discov(IF:57)、Pharmacol Rev(IF:18.964),Pharmacol Ther(IF:11.127),Semin Cancer Biol(IF:10.198)、Antioxid Redox Sign(IF:8.456),Carcinogenesis(IF:5.105),Br J Haematol(IF:5.67)等权威期刊与7部国外专著引用。
HouttuynoidE在治疗白血病药物中的应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用,属于医药领域。HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用;HouttuynoidE在制备抑制白血病细胞增殖药物中的应用,HouttuynoidE在制备诱导白血病细胞凋亡药物中的应用。HouttuynoidE通过抑制白血病细胞增殖和诱导白血病细胞凋亡,来对白血病进行治疗。对于本发明涉及的HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的用途属于首次公开,由于骨架类型属于全新的骨架类型,而且其对于白血病细胞的抑制活性强得意想不到。
小白菊内酯干预白血病细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该课题任务来源于2011年桂林市科学研究与技术开发计划项目(批准号:20110119-1-12)。该项目通过细胞培养、分子生物学实验、流式细胞仪及免疫组化等技术得到如下结果:体外实验成功分离培养Jurkat细胞、白血病原代细胞及骨髓基质细胞(BMSCs)证实PTL在5-20μmol/L时对Jurkat细胞的有显著地抑制增殖、促进凋亡作用,PTL能增强阿霉素及地塞米松对Jurkat细胞及复发难治的原代淋巴细胞白血病的增殖抑制及诱导凋亡作用,联用具有明显的协同作用。证实Adr单用组NF-κBp65的表达明显强于对照组,PTL联合Adr及Dex能明显降低Adr及Dex单药组的NF-κBp65水平,证实PTL单用及增强Adr及地塞米松抗淋巴细胞白血病的机制可能是通过抑制NF-κBp65信号通路来实现的。证实在BMSCs的环境下,PTL能抑制Jurkat细胞及原代白血病细胞的增殖,促进其凋亡;PTL能促进Jurkat细胞及原代白血病细胞G1期比例增加、S期和G2期比例减少;PTL能导致Jurkat细胞及原代白血病细胞线粒体膜电势下降;PTL能明显抑制Jurkat细胞及白血病原代细胞粘附于骨髓基质细胞的作用PTL能明显降低Jurkat细胞或及白血病原代细胞共培养模型中的粘附分子CXCR4的表达。通过对实验资料及数据整理,得出如下研究结论:复发难治性淋巴细胞白血病含有部分白血病干细胞;PTL有抗ALL作用,可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用,及可抑制白血病细胞粘附BMSCs;PTL抗白血病的作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路和改变细胞周期来抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡,还可能通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。该项目将实验数据及结果总结成文在国内外发表论文10篇,国外发表的论文被leukemiaResearch(SCI,IF=2.923)收录,国内论文均发表在国家级核心期刊,是区内最先开发研究PTL抗白血病的单位。该课题将分子生物学技术与细胞培养技术结合,从细胞学、分子生物学及整体水平对PTL抗Jurkat细胞及复发难治性白血病细胞中的作用及调控机制进行了研究,课题立题新颖,科学性强,设计合理,技术手段较先进,实验难度较大,结论可信。在项目实施过程中培养硕士研究生3名。该研究的各项性能指标均达到和超过任务合同书要求的指标,并达到预期目标。经广西医科大学图书馆查新提炼出该项目的创新点如下:该研究在国内首次证实PTL抗ALL作用;该研究在国内首次证实PTL可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用;该研究在国内外首次证实PTL可抑制白血病细胞粘附BMSCs;该研究在国内首次证实PTL抗白血病作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路、改变细胞周期及降低细胞膜电势来抑制白血病细胞增殖和促进凋亡;该研究在国内外首次证实PTL抗ALL的作用机制可以通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。将该项目结果及技术进行推广,已被右江民族医学院附属医院推广应用,取得了良好的社会效益及经济效益,有助于尽早开发、研究、应用PTL在临床上治疗复发难治性急性淋巴细胞白血病,PTL作为一种合理有效、价格适度的中药,可望发展为畅销的抗白血病药,在全社会推广应用,具有广阔的市场前景。
中药对白血病细胞相关基因、蛋白及其逆转耐药的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该项目的研究对象主要集中在白血病细胞株。课题利用MTT、细胞形态观察、流式细胞术、荧光染色、免疫荧光、核酸电泳、RT-PCR、Westernblot等方法,以及先进的基因芯片,激光共聚焦显微镜技术,检测了雄黄和槲皮素对白血病株和白血病人原代细胞的增殖、分化和凋亡的作用,以及相关基因表达的影响,雄黄作用后白血病细胞内基因表达谱的改变,以及槲皮素逆转白血病细胞耐药的效应和作用机制。实验结果显示,雄黄能抑制白血病细胞株的增殖生长,促进株凋亡;雄黄在蛋白水平调控PML基因的表达;基因芯片的检测结果显示:雄黄处理后白血病细胞内基因表达谱发生了改变,其中包括凋亡相关的基因,细胞信号转导相关基因,细胞周期相关蛋白等。
Survivin和B7-1基因对白血病细胞生物学特性的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
任务来源:山西医科大学第二医院博士启动基金(2006-14)。技术原理及性能指标:该课题选取急性白血病(AL)患者为研究对象,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓中Survivin和B7-1mRNA的表达情况,以明确Survivin和B7-1mRNA表达紊乱在AL的发病和复发中的作用;构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,纯化提取重组质粒DNA;将人全长Survivin基因真核载体Survivin-pIRES2-EGFP转染白血病K562细胞:用RT-PCR方法确定人SurvivinmRNA在K562细胞中顺利表达,并随转染时间的延长,SurvivinmRNA表达增加;将转基因后的白血病K562细胞与T淋巴细胞共同作用:用半定量RT-PCR和ELISA方法分别在基因水平和蛋白水平检测Survivin基因转染前后的K562细胞,对T淋巴细胞的CK表达情况的影响。技术的创造性与先进性:国内外关于Survivin转基因修饰的白血病疫苗的研究尚属空白。(1)该课题成功构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,并在K562细胞中顺利表达,通过转染Survivin增强白血病细胞的免疫原性,为后续建立稳定表达Survivin/B7-1的K562细胞系及白血病的靶向治疗研究奠定基础;(2)分别在基因水平和蛋白水平检测了转基因前后对T淋巴细胞细胞因子表达,以明确转染后的K562细胞对T淋巴细胞功能的影响,为今后白血病疫苗的研究工作奠定基础。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该研究为白血病疫苗的研究和白血病免疫治疗及靶向治疗提供了很好的理论依据和研究基础,使更多的白血病患者解除病痛,提高生活质量,长期生存,甚至痊愈。应用情况及存在问题:转染效率尚不稳定,应尽量将转染效率控制在较小的变化范围内;如果能与其他共刺激分子同时转染K562细胞,刺激T淋巴细胞,效果可能会更佳。
联合基因治疗抑制白血病细胞生长作用的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
本研究通过导入白血病细胞缺失、突变或表达异常的正常基因来恢复细胞正常生理过程,达到抑制白血病细胞生长的作用。本研究主要包括如下几方面:1.采用脂质体介导外源性野生型p16和p53基因转染白血病细胞株,免疫印渍及免疫细胞化学染色方法检测目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了目的基因的表达对白血病细胞的凋亡作用及促分化作用。结果发现,单独转染野生型p16或p53基因能抑制白血病细胞生长,使白血病细胞G1期细胞数增加,S期细胞减少;而当同时转染该两种基因时发现,恢复两种抑癌基因的表达能促进更多的白血病细胞的凋亡,达到更强的抑制白血病细胞生长作用的目地,并能更有效地促进白血病细胞向成熟方向分化。同时发现,与p16基因相比,p53基因显示出更强的致白血病细胞凋亡作用。2.使用血管内皮生长因子(VEGF)对白血病细胞株干预,发现VEGF一方面诱导血管生成素-2的表达,并由血管生成素-2通过激活促癌基因c-Ets1诱导金属蛋白酶而降解血管基底膜;另一方面,可直接上调肿瘤细胞的金属蛋白酶的表达,这些均有利于白血病细胞的侵袭转移。并且发现,VEGF能促进Bcl-XL蛋白表达,而使Bax收蛋白表达水平下降,通过影响Bcl-XL/Bax表达的比率,调节着caspase-3的活性,进而调节着细胞的凋亡;结果发现,VEGF对白血病细胞株具有抗凋亡作用。3.联合转染p53基因、血管生成抑素基因对白血病细胞的抑制作用:将携带野生型p53基因、血管生成抑素基因的真核表达载体转染白血病细胞,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达差异;结果表明,转染后目的基因在白血病细胞中表达,VEGF和Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达加强,联合转染p53和血管生成抑素基因对白血病细胞增殖有较强的抑制作用,且比单独转染这两种基因作用强,两者协同作用的机制可能是共同影响bcl-2、bax表达的途径。P53与血管生长抑素基因相互间促进表达,都能抑制VEGF的产生,导致VEGF表达量下降,共同抑制Bcl-2、促进Bax的表达,使白血病细胞的生长平衡倾向于凋亡。p53和p16INK4a 抑癌基因是细胞周期调节途径(p53途径和RB途径)中两个重要的成份,也是这两条途径受到损害时最易发生遗传学改变的基因之一。在血液系统肿瘤中,p53基因突变多发生于晚期,而慢粒急变、难治或复发白血病中突变率更高,可达60﹪以上。P16INK4a基因主要在淋巴系统肿瘤中发生改变,在急性淋巴细胞白血病(ALL)特别是儿童ALL中p16基因的缺失可达26﹪~75﹪,在急性髓系白血病中,缺失率很低,在慢性髓细胞白血病原始细胞危象期特别是原始淋巴细胞危象期时缺失率可达35﹪。所以,p53和p16INK4a抑癌基因较适合复发、难治急性白血病或慢粒急变白血病的基因治疗。以上研究结果表明,联合多种基因治疗,能更有效地抑制白血病细胞的生长,促进其分化及凋亡,弥补传统抗肿瘤治疗方法的缺陷。
维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立极其耐药机制研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该课题组建立维拉帕米耐药性K562(K562/VER)细胞系和阿霉素耐药性人白血病细胞系维拉帕米耐药性亚系(K562/ADM/VER)。采用MTT法测定细胞对维拉帕米的耐药性以及对潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。并建立了一种新的细胞内维拉帕米含量测定法,即高效液相法,这种方法比同位素法更敏感,而且操作简单安全,其敏感性和特异性均很高。研究维拉帕米耐药细胞亚系的相关基因表达变化,进一步探讨维拉帕米的耐药机制。该研究为研究肿瘤耐药逆转剂的耐药性及其对策开辟了道路;为肿瘤临床化疗时正常理解和合理使用耐药逆转剂提供参考,从而提高肿瘤病人的生存率。该项目对肿瘤耐药逆转剂及其调节剂的开发具有一定的应用前景。
组蛋白乙酰化对白血病细胞增殖和分化的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该研究所属科学技术领域为医药卫生领域,2008年河北省自然科学资金项目,项目编号为C2008000660,已按项目要求完成各项指标,并通过验收。主要技术内容:该研究应用丙戊酸钠体外处理t(8;21)/AML细胞株Kasumi-1细胞和原代细胞,通过运用细胞生物学、流式细胞术以及分子生物学等方法,观察丙戊酸钠对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡及血管新生的影响;该研究建立裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤模型,应用丙戊酸钠对裸鼠进行腹腔注射,运用细胞生物学、流式细胞术、免疫组织化学以及分子生物学等方法检测移植瘤组织细胞分化、凋亡和血管新生等相关指标,观察丙戊酸钠对裸鼠移植瘤的抑制作用;主要目的是探讨组蛋白乙酰化改变与白血病细胞分化和凋亡的关系,试图探寻组蛋白乙酰化改变对血管新生的影响,明确AML1-ETO融合蛋白在t(8;21)急性白血病发病中的作用,明确丙戊酸钠作为HDAC抑制剂对于t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-1细胞及裸鼠移植瘤的抗肿瘤活性和作用机制,为相关后续研究及最终应用于临床治疗血液系统恶性肿瘤提供新的理论依据。主要创新性成果:1.该研究证实了组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对于急性白血病细胞系Kasumi-1细胞增殖有抑制作用,可以诱导其分化、凋亡和抑制血管新生相关因子的表达,为丙戊酸钠临床应用提供体外实验理论依据;2.该研究建立了t(8;21)急性白血病裸鼠移植瘤模型,在国内首次明确了丙戊酸钠可以抑制移植瘤的生长,抑制移植瘤的血管新生,具有抗肿瘤的活性,填补了丙戊酸钠在动物实验中抗肿瘤活性研究的空白;3.明确了丙戊酸钠可以调控AML1靶基因GM-CSF、P21、VEGF启动子区乙酰化组蛋白H3的表达和下调组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达,证实了组蛋白乙酰化水平的变化是t(8;21)急性白血病的发生关键机制之一。推广应用及效益情况:该项目研究成果和相关实验技术与方法在承德医学院附属医院、承德市中心医院等多家单位和科研机构得到推广与应用,在体外实验和动物实验取得预期实验结果的前提下,针对于该地区难治性复发性白血病的患者,给予丙戊酸钠联合其他药物的联合化疗,取得明显的治疗效果。为白血病患者的靶向治疗提供新的治疗策略,取得明显的社会效益。该项目的研究内容已在国内权威专业期刊发表论文17篇。完成该项目共培养硕士研究生16名。推动科技进步的作用:该项目研究成果和技术方法多次被国内学者引用和借鉴,对于提高该研究领域科技水平起到了积极的推动作用,通过对丙戊酸钠抗白血病机制的研究为白血病的临床治疗和后续研究提供技术支撑和理论依据,也为靶向治疗恶性血液病提供新的方向,同时为开发研究老药新用提供新的思路。
密度梯度离心法分离白血病细胞
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
应用于白血病临床应用研究和实验血液学研究,有利于白血病等早期诊断、提高诊断率、疗效观察、缓解与复发的判定等;为实验血液学研究提供纯度高的、不同分化阶段的白血病细胞做样品,使多种研究得到理想的结果。来自白血病干细胞的白血病细胞停滞于不同分化阶段,越是幼稚的细胞其比重越低,比重相差千分之几,故应用适当的不连续密度梯度分离液可以将不同分化程度(比重不同)的白细胞及白血病细胞分离开,不仅纯度高得量多而且使少数细胞浓集易于被发现。已将患者白血病细胞分成6~9种细胞进行形态学分析,用于造血干祖细胞培养、细胞电泳等实验,取得早期诊断、疗效观察、缓解程度判定方面可靠依据。有论文发表可供参考。
找到24项技术成果数据。
找技术 >几个与白血病细胞耐药相关基因的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
1、应用和推广情况:这一成果在我院临床白血病和淋巴瘤的诊治过程中已广泛应用,为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;另外,浙江大学医学院第一附属医院、扬州大学附属苏北医院和枣庄中心医院等单位也使用VEGF作为白血病临床疗效和预后的判断的指标(见引用文献)。苏州大学附属一院、常州市第一人民医院等单位采用WT1作为白血病临床疗效和预后的判断的预测指标(见引用文献)。均获得较好的结果。 2、论文发表和被引用情况:4次在国际会议(ASH Meeting、中日血液学会议),10余次在全国血液学会议、全国白血病会议、全国实验血液学会议及江苏省血液学术会议上交流,引起了国内外同行专家广泛关注和充分肯定。本课题在研究过程中曾得到中国医学科学院天津血液学研究所杨纯正教授、江苏省血液病研究所陈子兴教授指导。课题组在国内外学术期刊上共发表论文49篇,37篇论文发表在核心期刊上,SCI收录论文7篇,总影响因子(IF)为23.3,中华医学系列杂志论文17篇。学术论文多次被引用,论文被引用200多次,其中他引189次,8次被高影响因子(IF>5.0)的科技论文引用,均为正面引用。研究项目共培养博、硕士研究生8名。 3、预期应用前景:一是为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;二是从基因转录调控环节探讨白血病细胞MDR产生的分子机制,寻找了新的克服MDR的作用靶点,为白血病细胞耐药的逆转和预防打下了良好的基础;三是对这些基因引起耐药的机制进行了深入的研究,这将有助于通过多步骤、多靶点控制白血病细胞的耐药形成。所以,本研究结果将对克服白血病细胞的耐药性,提高白血病治疗的缓解率,延长白血病患者的生存期具有重大意义,具有显著的社会效益和经济效益。
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用性研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用研究首次发现:1.小剂量DADS可诱导人白血病HL-60细胞分化,效果与ATRA相同。2.DADS诱导HL-60细胞分化差异基因CD11b、P21WAF1、STAT1、Calmodulin 1、PRDX2、CNOT8、PQBP1、RPS7等基因上调,PCNA、STAT3、hRRM2、CaMK、c-myc等基因下调。3.DADS诱导人白血病细胞分化的差异蛋白,galectin-10、hnRNP D0、plectin 1和TFα表达上调,DJ-1、Cofilin 1、calreticulin、LyGDI、PCNA、aldolase A、CA II、 GAPDH、Peroxiredoxin1、Peroxiredoxin3、ZFP9、AKI 2等表达下调。4.DADS诱导人白血病HL-60细胞分化的机制与抑制JAK1/STAT3通路下调STAT3与Myc核内表达水平、上调组蛋白H3、H4乙酰化水平和p21WAF1、下调calreticulin,增加CD11b与降低CD33表达和促进NBT还原能力、下调DJ-1促使DJ-1从细胞质转移到细胞核诱导分化有关。5.中等剂量DADS具有诱导凋亡作用,效果与ATRA相似。6.DADS诱导HL-60细胞凋亡相关基因发现,Fas-L、TRAF1、TRAF5、E2F6、IL8和CXCL10基因上调与Bag-1、MCL-1、Cyclin B、Cyclin C、BNIP3、Cks1p9、CUL4A、E2F-4、MCM2、MK167、DNAJA1、MRE11B、PCNA、HSPA4和HSPA9B等基因下调。7.DADS诱导白血病细胞凋亡机制与通过Chk1/CDC25C/CyclinB1/CDK1通路、抑制ERK和激活p38、活性氧介导JNK通路、MAPK和PI3K/Akt通路下调Mcl-1抑制PCNA结合或CDK1结合、MCL-1结合Bid导致MCL-1与Bax分离,启动线粒体凋亡通路和Rac2-NADPH氧化酶-ROS-JNK等多条通路有关。在国内外发表论文40篇,SCI收录13篇(总IF:34.261),被引用609篇次(总IF:569.371),他引479篇次(总IF:437.593),其中,Nal Rev Drug Discov(IF:57)、Pharmacol Rev(IF:18.964),Pharmacol Ther(IF:11.127),Semin Cancer Biol(IF:10.198)、Antioxid Redox Sign(IF:8.456),Carcinogenesis(IF:5.105),Br J Haematol(IF:5.67)等权威期刊与7部国外专著引用。
HouttuynoidE在治疗白血病药物中的应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用,属于医药领域。HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用;HouttuynoidE在制备抑制白血病细胞增殖药物中的应用,HouttuynoidE在制备诱导白血病细胞凋亡药物中的应用。HouttuynoidE通过抑制白血病细胞增殖和诱导白血病细胞凋亡,来对白血病进行治疗。对于本发明涉及的HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的用途属于首次公开,由于骨架类型属于全新的骨架类型,而且其对于白血病细胞的抑制活性强得意想不到。
小白菊内酯干预白血病细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该课题任务来源于2011年桂林市科学研究与技术开发计划项目(批准号:20110119-1-12)。该项目通过细胞培养、分子生物学实验、流式细胞仪及免疫组化等技术得到如下结果:体外实验成功分离培养Jurkat细胞、白血病原代细胞及骨髓基质细胞(BMSCs)证实PTL在5-20μmol/L时对Jurkat细胞的有显著地抑制增殖、促进凋亡作用,PTL能增强阿霉素及地塞米松对Jurkat细胞及复发难治的原代淋巴细胞白血病的增殖抑制及诱导凋亡作用,联用具有明显的协同作用。证实Adr单用组NF-κBp65的表达明显强于对照组,PTL联合Adr及Dex能明显降低Adr及Dex单药组的NF-κBp65水平,证实PTL单用及增强Adr及地塞米松抗淋巴细胞白血病的机制可能是通过抑制NF-κBp65信号通路来实现的。证实在BMSCs的环境下,PTL能抑制Jurkat细胞及原代白血病细胞的增殖,促进其凋亡;PTL能促进Jurkat细胞及原代白血病细胞G1期比例增加、S期和G2期比例减少;PTL能导致Jurkat细胞及原代白血病细胞线粒体膜电势下降;PTL能明显抑制Jurkat细胞及白血病原代细胞粘附于骨髓基质细胞的作用PTL能明显降低Jurkat细胞或及白血病原代细胞共培养模型中的粘附分子CXCR4的表达。通过对实验资料及数据整理,得出如下研究结论:复发难治性淋巴细胞白血病含有部分白血病干细胞;PTL有抗ALL作用,可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用,及可抑制白血病细胞粘附BMSCs;PTL抗白血病的作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路和改变细胞周期来抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡,还可能通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。该项目将实验数据及结果总结成文在国内外发表论文10篇,国外发表的论文被leukemiaResearch(SCI,IF=2.923)收录,国内论文均发表在国家级核心期刊,是区内最先开发研究PTL抗白血病的单位。该课题将分子生物学技术与细胞培养技术结合,从细胞学、分子生物学及整体水平对PTL抗Jurkat细胞及复发难治性白血病细胞中的作用及调控机制进行了研究,课题立题新颖,科学性强,设计合理,技术手段较先进,实验难度较大,结论可信。在项目实施过程中培养硕士研究生3名。该研究的各项性能指标均达到和超过任务合同书要求的指标,并达到预期目标。经广西医科大学图书馆查新提炼出该项目的创新点如下:该研究在国内首次证实PTL抗ALL作用;该研究在国内首次证实PTL可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用;该研究在国内外首次证实PTL可抑制白血病细胞粘附BMSCs;该研究在国内首次证实PTL抗白血病作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路、改变细胞周期及降低细胞膜电势来抑制白血病细胞增殖和促进凋亡;该研究在国内外首次证实PTL抗ALL的作用机制可以通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。将该项目结果及技术进行推广,已被右江民族医学院附属医院推广应用,取得了良好的社会效益及经济效益,有助于尽早开发、研究、应用PTL在临床上治疗复发难治性急性淋巴细胞白血病,PTL作为一种合理有效、价格适度的中药,可望发展为畅销的抗白血病药,在全社会推广应用,具有广阔的市场前景。
中药对白血病细胞相关基因、蛋白及其逆转耐药的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该项目的研究对象主要集中在白血病细胞株。课题利用MTT、细胞形态观察、流式细胞术、荧光染色、免疫荧光、核酸电泳、RT-PCR、Westernblot等方法,以及先进的基因芯片,激光共聚焦显微镜技术,检测了雄黄和槲皮素对白血病株和白血病人原代细胞的增殖、分化和凋亡的作用,以及相关基因表达的影响,雄黄作用后白血病细胞内基因表达谱的改变,以及槲皮素逆转白血病细胞耐药的效应和作用机制。实验结果显示,雄黄能抑制白血病细胞株的增殖生长,促进株凋亡;雄黄在蛋白水平调控PML基因的表达;基因芯片的检测结果显示:雄黄处理后白血病细胞内基因表达谱发生了改变,其中包括凋亡相关的基因,细胞信号转导相关基因,细胞周期相关蛋白等。
Survivin和B7-1基因对白血病细胞生物学特性的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
任务来源:山西医科大学第二医院博士启动基金(2006-14)。技术原理及性能指标:该课题选取急性白血病(AL)患者为研究对象,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓中Survivin和B7-1mRNA的表达情况,以明确Survivin和B7-1mRNA表达紊乱在AL的发病和复发中的作用;构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,纯化提取重组质粒DNA;将人全长Survivin基因真核载体Survivin-pIRES2-EGFP转染白血病K562细胞:用RT-PCR方法确定人SurvivinmRNA在K562细胞中顺利表达,并随转染时间的延长,SurvivinmRNA表达增加;将转基因后的白血病K562细胞与T淋巴细胞共同作用:用半定量RT-PCR和ELISA方法分别在基因水平和蛋白水平检测Survivin基因转染前后的K562细胞,对T淋巴细胞的CK表达情况的影响。技术的创造性与先进性:国内外关于Survivin转基因修饰的白血病疫苗的研究尚属空白。(1)该课题成功构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,并在K562细胞中顺利表达,通过转染Survivin增强白血病细胞的免疫原性,为后续建立稳定表达Survivin/B7-1的K562细胞系及白血病的靶向治疗研究奠定基础;(2)分别在基因水平和蛋白水平检测了转基因前后对T淋巴细胞细胞因子表达,以明确转染后的K562细胞对T淋巴细胞功能的影响,为今后白血病疫苗的研究工作奠定基础。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该研究为白血病疫苗的研究和白血病免疫治疗及靶向治疗提供了很好的理论依据和研究基础,使更多的白血病患者解除病痛,提高生活质量,长期生存,甚至痊愈。应用情况及存在问题:转染效率尚不稳定,应尽量将转染效率控制在较小的变化范围内;如果能与其他共刺激分子同时转染K562细胞,刺激T淋巴细胞,效果可能会更佳。
联合基因治疗抑制白血病细胞生长作用的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
本研究通过导入白血病细胞缺失、突变或表达异常的正常基因来恢复细胞正常生理过程,达到抑制白血病细胞生长的作用。本研究主要包括如下几方面:1.采用脂质体介导外源性野生型p16和p53基因转染白血病细胞株,免疫印渍及免疫细胞化学染色方法检测目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了目的基因的表达对白血病细胞的凋亡作用及促分化作用。结果发现,单独转染野生型p16或p53基因能抑制白血病细胞生长,使白血病细胞G1期细胞数增加,S期细胞减少;而当同时转染该两种基因时发现,恢复两种抑癌基因的表达能促进更多的白血病细胞的凋亡,达到更强的抑制白血病细胞生长作用的目地,并能更有效地促进白血病细胞向成熟方向分化。同时发现,与p16基因相比,p53基因显示出更强的致白血病细胞凋亡作用。2.使用血管内皮生长因子(VEGF)对白血病细胞株干预,发现VEGF一方面诱导血管生成素-2的表达,并由血管生成素-2通过激活促癌基因c-Ets1诱导金属蛋白酶而降解血管基底膜;另一方面,可直接上调肿瘤细胞的金属蛋白酶的表达,这些均有利于白血病细胞的侵袭转移。并且发现,VEGF能促进Bcl-XL蛋白表达,而使Bax收蛋白表达水平下降,通过影响Bcl-XL/Bax表达的比率,调节着caspase-3的活性,进而调节着细胞的凋亡;结果发现,VEGF对白血病细胞株具有抗凋亡作用。3.联合转染p53基因、血管生成抑素基因对白血病细胞的抑制作用:将携带野生型p53基因、血管生成抑素基因的真核表达载体转染白血病细胞,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达差异;结果表明,转染后目的基因在白血病细胞中表达,VEGF和Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达加强,联合转染p53和血管生成抑素基因对白血病细胞增殖有较强的抑制作用,且比单独转染这两种基因作用强,两者协同作用的机制可能是共同影响bcl-2、bax表达的途径。P53与血管生长抑素基因相互间促进表达,都能抑制VEGF的产生,导致VEGF表达量下降,共同抑制Bcl-2、促进Bax的表达,使白血病细胞的生长平衡倾向于凋亡。p53和p16INK4a 抑癌基因是细胞周期调节途径(p53途径和RB途径)中两个重要的成份,也是这两条途径受到损害时最易发生遗传学改变的基因之一。在血液系统肿瘤中,p53基因突变多发生于晚期,而慢粒急变、难治或复发白血病中突变率更高,可达60﹪以上。P16INK4a基因主要在淋巴系统肿瘤中发生改变,在急性淋巴细胞白血病(ALL)特别是儿童ALL中p16基因的缺失可达26﹪~75﹪,在急性髓系白血病中,缺失率很低,在慢性髓细胞白血病原始细胞危象期特别是原始淋巴细胞危象期时缺失率可达35﹪。所以,p53和p16INK4a抑癌基因较适合复发、难治急性白血病或慢粒急变白血病的基因治疗。以上研究结果表明,联合多种基因治疗,能更有效地抑制白血病细胞的生长,促进其分化及凋亡,弥补传统抗肿瘤治疗方法的缺陷。
维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立极其耐药机制研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该课题组建立维拉帕米耐药性K562(K562/VER)细胞系和阿霉素耐药性人白血病细胞系维拉帕米耐药性亚系(K562/ADM/VER)。采用MTT法测定细胞对维拉帕米的耐药性以及对潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。并建立了一种新的细胞内维拉帕米含量测定法,即高效液相法,这种方法比同位素法更敏感,而且操作简单安全,其敏感性和特异性均很高。研究维拉帕米耐药细胞亚系的相关基因表达变化,进一步探讨维拉帕米的耐药机制。该研究为研究肿瘤耐药逆转剂的耐药性及其对策开辟了道路;为肿瘤临床化疗时正常理解和合理使用耐药逆转剂提供参考,从而提高肿瘤病人的生存率。该项目对肿瘤耐药逆转剂及其调节剂的开发具有一定的应用前景。
组蛋白乙酰化对白血病细胞增殖和分化的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该研究所属科学技术领域为医药卫生领域,2008年河北省自然科学资金项目,项目编号为C2008000660,已按项目要求完成各项指标,并通过验收。主要技术内容:该研究应用丙戊酸钠体外处理t(8;21)/AML细胞株Kasumi-1细胞和原代细胞,通过运用细胞生物学、流式细胞术以及分子生物学等方法,观察丙戊酸钠对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡及血管新生的影响;该研究建立裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤模型,应用丙戊酸钠对裸鼠进行腹腔注射,运用细胞生物学、流式细胞术、免疫组织化学以及分子生物学等方法检测移植瘤组织细胞分化、凋亡和血管新生等相关指标,观察丙戊酸钠对裸鼠移植瘤的抑制作用;主要目的是探讨组蛋白乙酰化改变与白血病细胞分化和凋亡的关系,试图探寻组蛋白乙酰化改变对血管新生的影响,明确AML1-ETO融合蛋白在t(8;21)急性白血病发病中的作用,明确丙戊酸钠作为HDAC抑制剂对于t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-1细胞及裸鼠移植瘤的抗肿瘤活性和作用机制,为相关后续研究及最终应用于临床治疗血液系统恶性肿瘤提供新的理论依据。主要创新性成果:1.该研究证实了组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对于急性白血病细胞系Kasumi-1细胞增殖有抑制作用,可以诱导其分化、凋亡和抑制血管新生相关因子的表达,为丙戊酸钠临床应用提供体外实验理论依据;2.该研究建立了t(8;21)急性白血病裸鼠移植瘤模型,在国内首次明确了丙戊酸钠可以抑制移植瘤的生长,抑制移植瘤的血管新生,具有抗肿瘤的活性,填补了丙戊酸钠在动物实验中抗肿瘤活性研究的空白;3.明确了丙戊酸钠可以调控AML1靶基因GM-CSF、P21、VEGF启动子区乙酰化组蛋白H3的表达和下调组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达,证实了组蛋白乙酰化水平的变化是t(8;21)急性白血病的发生关键机制之一。推广应用及效益情况:该项目研究成果和相关实验技术与方法在承德医学院附属医院、承德市中心医院等多家单位和科研机构得到推广与应用,在体外实验和动物实验取得预期实验结果的前提下,针对于该地区难治性复发性白血病的患者,给予丙戊酸钠联合其他药物的联合化疗,取得明显的治疗效果。为白血病患者的靶向治疗提供新的治疗策略,取得明显的社会效益。该项目的研究内容已在国内权威专业期刊发表论文17篇。完成该项目共培养硕士研究生16名。推动科技进步的作用:该项目研究成果和技术方法多次被国内学者引用和借鉴,对于提高该研究领域科技水平起到了积极的推动作用,通过对丙戊酸钠抗白血病机制的研究为白血病的临床治疗和后续研究提供技术支撑和理论依据,也为靶向治疗恶性血液病提供新的方向,同时为开发研究老药新用提供新的思路。
密度梯度离心法分离白血病细胞
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
应用于白血病临床应用研究和实验血液学研究,有利于白血病等早期诊断、提高诊断率、疗效观察、缓解与复发的判定等;为实验血液学研究提供纯度高的、不同分化阶段的白血病细胞做样品,使多种研究得到理想的结果。来自白血病干细胞的白血病细胞停滞于不同分化阶段,越是幼稚的细胞其比重越低,比重相差千分之几,故应用适当的不连续密度梯度分离液可以将不同分化程度(比重不同)的白细胞及白血病细胞分离开,不仅纯度高得量多而且使少数细胞浓集易于被发现。已将患者白血病细胞分成6~9种细胞进行形态学分析,用于造血干祖细胞培养、细胞电泳等实验,取得早期诊断、疗效观察、缓解程度判定方面可靠依据。有论文发表可供参考。
找到24项技术成果数据。
找技术 >几个与白血病细胞耐药相关基因的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
1、应用和推广情况:这一成果在我院临床白血病和淋巴瘤的诊治过程中已广泛应用,为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;另外,浙江大学医学院第一附属医院、扬州大学附属苏北医院和枣庄中心医院等单位也使用VEGF作为白血病临床疗效和预后的判断的指标(见引用文献)。苏州大学附属一院、常州市第一人民医院等单位采用WT1作为白血病临床疗效和预后的判断的预测指标(见引用文献)。均获得较好的结果。 2、论文发表和被引用情况:4次在国际会议(ASH Meeting、中日血液学会议),10余次在全国血液学会议、全国白血病会议、全国实验血液学会议及江苏省血液学术会议上交流,引起了国内外同行专家广泛关注和充分肯定。本课题在研究过程中曾得到中国医学科学院天津血液学研究所杨纯正教授、江苏省血液病研究所陈子兴教授指导。课题组在国内外学术期刊上共发表论文49篇,37篇论文发表在核心期刊上,SCI收录论文7篇,总影响因子(IF)为23.3,中华医学系列杂志论文17篇。学术论文多次被引用,论文被引用200多次,其中他引189次,8次被高影响因子(IF>5.0)的科技论文引用,均为正面引用。研究项目共培养博、硕士研究生8名。 3、预期应用前景:一是为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;二是从基因转录调控环节探讨白血病细胞MDR产生的分子机制,寻找了新的克服MDR的作用靶点,为白血病细胞耐药的逆转和预防打下了良好的基础;三是对这些基因引起耐药的机制进行了深入的研究,这将有助于通过多步骤、多靶点控制白血病细胞的耐药形成。所以,本研究结果将对克服白血病细胞的耐药性,提高白血病治疗的缓解率,延长白血病患者的生存期具有重大意义,具有显著的社会效益和经济效益。
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用性研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用研究首次发现:1.小剂量DADS可诱导人白血病HL-60细胞分化,效果与ATRA相同。2.DADS诱导HL-60细胞分化差异基因CD11b、P21WAF1、STAT1、Calmodulin 1、PRDX2、CNOT8、PQBP1、RPS7等基因上调,PCNA、STAT3、hRRM2、CaMK、c-myc等基因下调。3.DADS诱导人白血病细胞分化的差异蛋白,galectin-10、hnRNP D0、plectin 1和TFα表达上调,DJ-1、Cofilin 1、calreticulin、LyGDI、PCNA、aldolase A、CA II、 GAPDH、Peroxiredoxin1、Peroxiredoxin3、ZFP9、AKI 2等表达下调。4.DADS诱导人白血病HL-60细胞分化的机制与抑制JAK1/STAT3通路下调STAT3与Myc核内表达水平、上调组蛋白H3、H4乙酰化水平和p21WAF1、下调calreticulin,增加CD11b与降低CD33表达和促进NBT还原能力、下调DJ-1促使DJ-1从细胞质转移到细胞核诱导分化有关。5.中等剂量DADS具有诱导凋亡作用,效果与ATRA相似。6.DADS诱导HL-60细胞凋亡相关基因发现,Fas-L、TRAF1、TRAF5、E2F6、IL8和CXCL10基因上调与Bag-1、MCL-1、Cyclin B、Cyclin C、BNIP3、Cks1p9、CUL4A、E2F-4、MCM2、MK167、DNAJA1、MRE11B、PCNA、HSPA4和HSPA9B等基因下调。7.DADS诱导白血病细胞凋亡机制与通过Chk1/CDC25C/CyclinB1/CDK1通路、抑制ERK和激活p38、活性氧介导JNK通路、MAPK和PI3K/Akt通路下调Mcl-1抑制PCNA结合或CDK1结合、MCL-1结合Bid导致MCL-1与Bax分离,启动线粒体凋亡通路和Rac2-NADPH氧化酶-ROS-JNK等多条通路有关。在国内外发表论文40篇,SCI收录13篇(总IF:34.261),被引用609篇次(总IF:569.371),他引479篇次(总IF:437.593),其中,Nal Rev Drug Discov(IF:57)、Pharmacol Rev(IF:18.964),Pharmacol Ther(IF:11.127),Semin Cancer Biol(IF:10.198)、Antioxid Redox Sign(IF:8.456),Carcinogenesis(IF:5.105),Br J Haematol(IF:5.67)等权威期刊与7部国外专著引用。
HouttuynoidE在治疗白血病药物中的应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用,属于医药领域。HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用;HouttuynoidE在制备抑制白血病细胞增殖药物中的应用,HouttuynoidE在制备诱导白血病细胞凋亡药物中的应用。HouttuynoidE通过抑制白血病细胞增殖和诱导白血病细胞凋亡,来对白血病进行治疗。对于本发明涉及的HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的用途属于首次公开,由于骨架类型属于全新的骨架类型,而且其对于白血病细胞的抑制活性强得意想不到。
小白菊内酯干预白血病细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该课题任务来源于2011年桂林市科学研究与技术开发计划项目(批准号:20110119-1-12)。该项目通过细胞培养、分子生物学实验、流式细胞仪及免疫组化等技术得到如下结果:体外实验成功分离培养Jurkat细胞、白血病原代细胞及骨髓基质细胞(BMSCs)证实PTL在5-20μmol/L时对Jurkat细胞的有显著地抑制增殖、促进凋亡作用,PTL能增强阿霉素及地塞米松对Jurkat细胞及复发难治的原代淋巴细胞白血病的增殖抑制及诱导凋亡作用,联用具有明显的协同作用。证实Adr单用组NF-κBp65的表达明显强于对照组,PTL联合Adr及Dex能明显降低Adr及Dex单药组的NF-κBp65水平,证实PTL单用及增强Adr及地塞米松抗淋巴细胞白血病的机制可能是通过抑制NF-κBp65信号通路来实现的。证实在BMSCs的环境下,PTL能抑制Jurkat细胞及原代白血病细胞的增殖,促进其凋亡;PTL能促进Jurkat细胞及原代白血病细胞G1期比例增加、S期和G2期比例减少;PTL能导致Jurkat细胞及原代白血病细胞线粒体膜电势下降;PTL能明显抑制Jurkat细胞及白血病原代细胞粘附于骨髓基质细胞的作用PTL能明显降低Jurkat细胞或及白血病原代细胞共培养模型中的粘附分子CXCR4的表达。通过对实验资料及数据整理,得出如下研究结论:复发难治性淋巴细胞白血病含有部分白血病干细胞;PTL有抗ALL作用,可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用,及可抑制白血病细胞粘附BMSCs;PTL抗白血病的作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路和改变细胞周期来抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡,还可能通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。该项目将实验数据及结果总结成文在国内外发表论文10篇,国外发表的论文被leukemiaResearch(SCI,IF=2.923)收录,国内论文均发表在国家级核心期刊,是区内最先开发研究PTL抗白血病的单位。该课题将分子生物学技术与细胞培养技术结合,从细胞学、分子生物学及整体水平对PTL抗Jurkat细胞及复发难治性白血病细胞中的作用及调控机制进行了研究,课题立题新颖,科学性强,设计合理,技术手段较先进,实验难度较大,结论可信。在项目实施过程中培养硕士研究生3名。该研究的各项性能指标均达到和超过任务合同书要求的指标,并达到预期目标。经广西医科大学图书馆查新提炼出该项目的创新点如下:该研究在国内首次证实PTL抗ALL作用;该研究在国内首次证实PTL可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用;该研究在国内外首次证实PTL可抑制白血病细胞粘附BMSCs;该研究在国内首次证实PTL抗白血病作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路、改变细胞周期及降低细胞膜电势来抑制白血病细胞增殖和促进凋亡;该研究在国内外首次证实PTL抗ALL的作用机制可以通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。将该项目结果及技术进行推广,已被右江民族医学院附属医院推广应用,取得了良好的社会效益及经济效益,有助于尽早开发、研究、应用PTL在临床上治疗复发难治性急性淋巴细胞白血病,PTL作为一种合理有效、价格适度的中药,可望发展为畅销的抗白血病药,在全社会推广应用,具有广阔的市场前景。
中药对白血病细胞相关基因、蛋白及其逆转耐药的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该项目的研究对象主要集中在白血病细胞株。课题利用MTT、细胞形态观察、流式细胞术、荧光染色、免疫荧光、核酸电泳、RT-PCR、Westernblot等方法,以及先进的基因芯片,激光共聚焦显微镜技术,检测了雄黄和槲皮素对白血病株和白血病人原代细胞的增殖、分化和凋亡的作用,以及相关基因表达的影响,雄黄作用后白血病细胞内基因表达谱的改变,以及槲皮素逆转白血病细胞耐药的效应和作用机制。实验结果显示,雄黄能抑制白血病细胞株的增殖生长,促进株凋亡;雄黄在蛋白水平调控PML基因的表达;基因芯片的检测结果显示:雄黄处理后白血病细胞内基因表达谱发生了改变,其中包括凋亡相关的基因,细胞信号转导相关基因,细胞周期相关蛋白等。
Survivin和B7-1基因对白血病细胞生物学特性的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
任务来源:山西医科大学第二医院博士启动基金(2006-14)。技术原理及性能指标:该课题选取急性白血病(AL)患者为研究对象,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓中Survivin和B7-1mRNA的表达情况,以明确Survivin和B7-1mRNA表达紊乱在AL的发病和复发中的作用;构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,纯化提取重组质粒DNA;将人全长Survivin基因真核载体Survivin-pIRES2-EGFP转染白血病K562细胞:用RT-PCR方法确定人SurvivinmRNA在K562细胞中顺利表达,并随转染时间的延长,SurvivinmRNA表达增加;将转基因后的白血病K562细胞与T淋巴细胞共同作用:用半定量RT-PCR和ELISA方法分别在基因水平和蛋白水平检测Survivin基因转染前后的K562细胞,对T淋巴细胞的CK表达情况的影响。技术的创造性与先进性:国内外关于Survivin转基因修饰的白血病疫苗的研究尚属空白。(1)该课题成功构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,并在K562细胞中顺利表达,通过转染Survivin增强白血病细胞的免疫原性,为后续建立稳定表达Survivin/B7-1的K562细胞系及白血病的靶向治疗研究奠定基础;(2)分别在基因水平和蛋白水平检测了转基因前后对T淋巴细胞细胞因子表达,以明确转染后的K562细胞对T淋巴细胞功能的影响,为今后白血病疫苗的研究工作奠定基础。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该研究为白血病疫苗的研究和白血病免疫治疗及靶向治疗提供了很好的理论依据和研究基础,使更多的白血病患者解除病痛,提高生活质量,长期生存,甚至痊愈。应用情况及存在问题:转染效率尚不稳定,应尽量将转染效率控制在较小的变化范围内;如果能与其他共刺激分子同时转染K562细胞,刺激T淋巴细胞,效果可能会更佳。
联合基因治疗抑制白血病细胞生长作用的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
本研究通过导入白血病细胞缺失、突变或表达异常的正常基因来恢复细胞正常生理过程,达到抑制白血病细胞生长的作用。本研究主要包括如下几方面:1.采用脂质体介导外源性野生型p16和p53基因转染白血病细胞株,免疫印渍及免疫细胞化学染色方法检测目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了目的基因的表达对白血病细胞的凋亡作用及促分化作用。结果发现,单独转染野生型p16或p53基因能抑制白血病细胞生长,使白血病细胞G1期细胞数增加,S期细胞减少;而当同时转染该两种基因时发现,恢复两种抑癌基因的表达能促进更多的白血病细胞的凋亡,达到更强的抑制白血病细胞生长作用的目地,并能更有效地促进白血病细胞向成熟方向分化。同时发现,与p16基因相比,p53基因显示出更强的致白血病细胞凋亡作用。2.使用血管内皮生长因子(VEGF)对白血病细胞株干预,发现VEGF一方面诱导血管生成素-2的表达,并由血管生成素-2通过激活促癌基因c-Ets1诱导金属蛋白酶而降解血管基底膜;另一方面,可直接上调肿瘤细胞的金属蛋白酶的表达,这些均有利于白血病细胞的侵袭转移。并且发现,VEGF能促进Bcl-XL蛋白表达,而使Bax收蛋白表达水平下降,通过影响Bcl-XL/Bax表达的比率,调节着caspase-3的活性,进而调节着细胞的凋亡;结果发现,VEGF对白血病细胞株具有抗凋亡作用。3.联合转染p53基因、血管生成抑素基因对白血病细胞的抑制作用:将携带野生型p53基因、血管生成抑素基因的真核表达载体转染白血病细胞,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达差异;结果表明,转染后目的基因在白血病细胞中表达,VEGF和Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达加强,联合转染p53和血管生成抑素基因对白血病细胞增殖有较强的抑制作用,且比单独转染这两种基因作用强,两者协同作用的机制可能是共同影响bcl-2、bax表达的途径。P53与血管生长抑素基因相互间促进表达,都能抑制VEGF的产生,导致VEGF表达量下降,共同抑制Bcl-2、促进Bax的表达,使白血病细胞的生长平衡倾向于凋亡。p53和p16INK4a 抑癌基因是细胞周期调节途径(p53途径和RB途径)中两个重要的成份,也是这两条途径受到损害时最易发生遗传学改变的基因之一。在血液系统肿瘤中,p53基因突变多发生于晚期,而慢粒急变、难治或复发白血病中突变率更高,可达60﹪以上。P16INK4a基因主要在淋巴系统肿瘤中发生改变,在急性淋巴细胞白血病(ALL)特别是儿童ALL中p16基因的缺失可达26﹪~75﹪,在急性髓系白血病中,缺失率很低,在慢性髓细胞白血病原始细胞危象期特别是原始淋巴细胞危象期时缺失率可达35﹪。所以,p53和p16INK4a抑癌基因较适合复发、难治急性白血病或慢粒急变白血病的基因治疗。以上研究结果表明,联合多种基因治疗,能更有效地抑制白血病细胞的生长,促进其分化及凋亡,弥补传统抗肿瘤治疗方法的缺陷。
维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立极其耐药机制研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该课题组建立维拉帕米耐药性K562(K562/VER)细胞系和阿霉素耐药性人白血病细胞系维拉帕米耐药性亚系(K562/ADM/VER)。采用MTT法测定细胞对维拉帕米的耐药性以及对潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。并建立了一种新的细胞内维拉帕米含量测定法,即高效液相法,这种方法比同位素法更敏感,而且操作简单安全,其敏感性和特异性均很高。研究维拉帕米耐药细胞亚系的相关基因表达变化,进一步探讨维拉帕米的耐药机制。该研究为研究肿瘤耐药逆转剂的耐药性及其对策开辟了道路;为肿瘤临床化疗时正常理解和合理使用耐药逆转剂提供参考,从而提高肿瘤病人的生存率。该项目对肿瘤耐药逆转剂及其调节剂的开发具有一定的应用前景。
组蛋白乙酰化对白血病细胞增殖和分化的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该研究所属科学技术领域为医药卫生领域,2008年河北省自然科学资金项目,项目编号为C2008000660,已按项目要求完成各项指标,并通过验收。主要技术内容:该研究应用丙戊酸钠体外处理t(8;21)/AML细胞株Kasumi-1细胞和原代细胞,通过运用细胞生物学、流式细胞术以及分子生物学等方法,观察丙戊酸钠对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡及血管新生的影响;该研究建立裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤模型,应用丙戊酸钠对裸鼠进行腹腔注射,运用细胞生物学、流式细胞术、免疫组织化学以及分子生物学等方法检测移植瘤组织细胞分化、凋亡和血管新生等相关指标,观察丙戊酸钠对裸鼠移植瘤的抑制作用;主要目的是探讨组蛋白乙酰化改变与白血病细胞分化和凋亡的关系,试图探寻组蛋白乙酰化改变对血管新生的影响,明确AML1-ETO融合蛋白在t(8;21)急性白血病发病中的作用,明确丙戊酸钠作为HDAC抑制剂对于t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-1细胞及裸鼠移植瘤的抗肿瘤活性和作用机制,为相关后续研究及最终应用于临床治疗血液系统恶性肿瘤提供新的理论依据。主要创新性成果:1.该研究证实了组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对于急性白血病细胞系Kasumi-1细胞增殖有抑制作用,可以诱导其分化、凋亡和抑制血管新生相关因子的表达,为丙戊酸钠临床应用提供体外实验理论依据;2.该研究建立了t(8;21)急性白血病裸鼠移植瘤模型,在国内首次明确了丙戊酸钠可以抑制移植瘤的生长,抑制移植瘤的血管新生,具有抗肿瘤的活性,填补了丙戊酸钠在动物实验中抗肿瘤活性研究的空白;3.明确了丙戊酸钠可以调控AML1靶基因GM-CSF、P21、VEGF启动子区乙酰化组蛋白H3的表达和下调组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达,证实了组蛋白乙酰化水平的变化是t(8;21)急性白血病的发生关键机制之一。推广应用及效益情况:该项目研究成果和相关实验技术与方法在承德医学院附属医院、承德市中心医院等多家单位和科研机构得到推广与应用,在体外实验和动物实验取得预期实验结果的前提下,针对于该地区难治性复发性白血病的患者,给予丙戊酸钠联合其他药物的联合化疗,取得明显的治疗效果。为白血病患者的靶向治疗提供新的治疗策略,取得明显的社会效益。该项目的研究内容已在国内权威专业期刊发表论文17篇。完成该项目共培养硕士研究生16名。推动科技进步的作用:该项目研究成果和技术方法多次被国内学者引用和借鉴,对于提高该研究领域科技水平起到了积极的推动作用,通过对丙戊酸钠抗白血病机制的研究为白血病的临床治疗和后续研究提供技术支撑和理论依据,也为靶向治疗恶性血液病提供新的方向,同时为开发研究老药新用提供新的思路。
密度梯度离心法分离白血病细胞
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
应用于白血病临床应用研究和实验血液学研究,有利于白血病等早期诊断、提高诊断率、疗效观察、缓解与复发的判定等;为实验血液学研究提供纯度高的、不同分化阶段的白血病细胞做样品,使多种研究得到理想的结果。来自白血病干细胞的白血病细胞停滞于不同分化阶段,越是幼稚的细胞其比重越低,比重相差千分之几,故应用适当的不连续密度梯度分离液可以将不同分化程度(比重不同)的白细胞及白血病细胞分离开,不仅纯度高得量多而且使少数细胞浓集易于被发现。已将患者白血病细胞分成6~9种细胞进行形态学分析,用于造血干祖细胞培养、细胞电泳等实验,取得早期诊断、疗效观察、缓解程度判定方面可靠依据。有论文发表可供参考。
找到24项技术成果数据。
找技术 >几个与白血病细胞耐药相关基因的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
1、应用和推广情况:这一成果在我院临床白血病和淋巴瘤的诊治过程中已广泛应用,为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;另外,浙江大学医学院第一附属医院、扬州大学附属苏北医院和枣庄中心医院等单位也使用VEGF作为白血病临床疗效和预后的判断的指标(见引用文献)。苏州大学附属一院、常州市第一人民医院等单位采用WT1作为白血病临床疗效和预后的判断的预测指标(见引用文献)。均获得较好的结果。 2、论文发表和被引用情况:4次在国际会议(ASH Meeting、中日血液学会议),10余次在全国血液学会议、全国白血病会议、全国实验血液学会议及江苏省血液学术会议上交流,引起了国内外同行专家广泛关注和充分肯定。本课题在研究过程中曾得到中国医学科学院天津血液学研究所杨纯正教授、江苏省血液病研究所陈子兴教授指导。课题组在国内外学术期刊上共发表论文49篇,37篇论文发表在核心期刊上,SCI收录论文7篇,总影响因子(IF)为23.3,中华医学系列杂志论文17篇。学术论文多次被引用,论文被引用200多次,其中他引189次,8次被高影响因子(IF>5.0)的科技论文引用,均为正面引用。研究项目共培养博、硕士研究生8名。 3、预期应用前景:一是为临床治疗方案的选择、临床疗效和预后的判断提供了良好的预测指标;二是从基因转录调控环节探讨白血病细胞MDR产生的分子机制,寻找了新的克服MDR的作用靶点,为白血病细胞耐药的逆转和预防打下了良好的基础;三是对这些基因引起耐药的机制进行了深入的研究,这将有助于通过多步骤、多靶点控制白血病细胞的耐药形成。所以,本研究结果将对克服白血病细胞的耐药性,提高白血病治疗的缓解率,延长白血病患者的生存期具有重大意义,具有显著的社会效益和经济效益。
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用性研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用研究首次发现:1.小剂量DADS可诱导人白血病HL-60细胞分化,效果与ATRA相同。2.DADS诱导HL-60细胞分化差异基因CD11b、P21WAF1、STAT1、Calmodulin 1、PRDX2、CNOT8、PQBP1、RPS7等基因上调,PCNA、STAT3、hRRM2、CaMK、c-myc等基因下调。3.DADS诱导人白血病细胞分化的差异蛋白,galectin-10、hnRNP D0、plectin 1和TFα表达上调,DJ-1、Cofilin 1、calreticulin、LyGDI、PCNA、aldolase A、CA II、 GAPDH、Peroxiredoxin1、Peroxiredoxin3、ZFP9、AKI 2等表达下调。4.DADS诱导人白血病HL-60细胞分化的机制与抑制JAK1/STAT3通路下调STAT3与Myc核内表达水平、上调组蛋白H3、H4乙酰化水平和p21WAF1、下调calreticulin,增加CD11b与降低CD33表达和促进NBT还原能力、下调DJ-1促使DJ-1从细胞质转移到细胞核诱导分化有关。5.中等剂量DADS具有诱导凋亡作用,效果与ATRA相似。6.DADS诱导HL-60细胞凋亡相关基因发现,Fas-L、TRAF1、TRAF5、E2F6、IL8和CXCL10基因上调与Bag-1、MCL-1、Cyclin B、Cyclin C、BNIP3、Cks1p9、CUL4A、E2F-4、MCM2、MK167、DNAJA1、MRE11B、PCNA、HSPA4和HSPA9B等基因下调。7.DADS诱导白血病细胞凋亡机制与通过Chk1/CDC25C/CyclinB1/CDK1通路、抑制ERK和激活p38、活性氧介导JNK通路、MAPK和PI3K/Akt通路下调Mcl-1抑制PCNA结合或CDK1结合、MCL-1结合Bid导致MCL-1与Bax分离,启动线粒体凋亡通路和Rac2-NADPH氧化酶-ROS-JNK等多条通路有关。在国内外发表论文40篇,SCI收录13篇(总IF:34.261),被引用609篇次(总IF:569.371),他引479篇次(总IF:437.593),其中,Nal Rev Drug Discov(IF:57)、Pharmacol Rev(IF:18.964),Pharmacol Ther(IF:11.127),Semin Cancer Biol(IF:10.198)、Antioxid Redox Sign(IF:8.456),Carcinogenesis(IF:5.105),Br J Haematol(IF:5.67)等权威期刊与7部国外专著引用。
HouttuynoidE在治疗白血病药物中的应用
成熟度:正在研发
技术类型:发明
应用行业:制造业
技术简介
本发明涉及HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用,属于医药领域。HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的应用;HouttuynoidE在制备抑制白血病细胞增殖药物中的应用,HouttuynoidE在制备诱导白血病细胞凋亡药物中的应用。HouttuynoidE通过抑制白血病细胞增殖和诱导白血病细胞凋亡,来对白血病进行治疗。对于本发明涉及的HouttuynoidE在制备治疗白血病药物中的用途属于首次公开,由于骨架类型属于全新的骨架类型,而且其对于白血病细胞的抑制活性强得意想不到。
小白菊内酯干预白血病细胞粘附骨髓基质细胞的作用及机制
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该课题任务来源于2011年桂林市科学研究与技术开发计划项目(批准号:20110119-1-12)。该项目通过细胞培养、分子生物学实验、流式细胞仪及免疫组化等技术得到如下结果:体外实验成功分离培养Jurkat细胞、白血病原代细胞及骨髓基质细胞(BMSCs)证实PTL在5-20μmol/L时对Jurkat细胞的有显著地抑制增殖、促进凋亡作用,PTL能增强阿霉素及地塞米松对Jurkat细胞及复发难治的原代淋巴细胞白血病的增殖抑制及诱导凋亡作用,联用具有明显的协同作用。证实Adr单用组NF-κBp65的表达明显强于对照组,PTL联合Adr及Dex能明显降低Adr及Dex单药组的NF-κBp65水平,证实PTL单用及增强Adr及地塞米松抗淋巴细胞白血病的机制可能是通过抑制NF-κBp65信号通路来实现的。证实在BMSCs的环境下,PTL能抑制Jurkat细胞及原代白血病细胞的增殖,促进其凋亡;PTL能促进Jurkat细胞及原代白血病细胞G1期比例增加、S期和G2期比例减少;PTL能导致Jurkat细胞及原代白血病细胞线粒体膜电势下降;PTL能明显抑制Jurkat细胞及白血病原代细胞粘附于骨髓基质细胞的作用PTL能明显降低Jurkat细胞或及白血病原代细胞共培养模型中的粘附分子CXCR4的表达。通过对实验资料及数据整理,得出如下研究结论:复发难治性淋巴细胞白血病含有部分白血病干细胞;PTL有抗ALL作用,可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用,及可抑制白血病细胞粘附BMSCs;PTL抗白血病的作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路和改变细胞周期来抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡,还可能通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。该项目将实验数据及结果总结成文在国内外发表论文10篇,国外发表的论文被leukemiaResearch(SCI,IF=2.923)收录,国内论文均发表在国家级核心期刊,是区内最先开发研究PTL抗白血病的单位。该课题将分子生物学技术与细胞培养技术结合,从细胞学、分子生物学及整体水平对PTL抗Jurkat细胞及复发难治性白血病细胞中的作用及调控机制进行了研究,课题立题新颖,科学性强,设计合理,技术手段较先进,实验难度较大,结论可信。在项目实施过程中培养硕士研究生3名。该研究的各项性能指标均达到和超过任务合同书要求的指标,并达到预期目标。经广西医科大学图书馆查新提炼出该项目的创新点如下:该研究在国内首次证实PTL抗ALL作用;该研究在国内首次证实PTL可增强阿霉素及地塞米松抗ALL的作用;该研究在国内外首次证实PTL可抑制白血病细胞粘附BMSCs;该研究在国内首次证实PTL抗白血病作用机制可能是通过抑制NF-κB65信号通路、改变细胞周期及降低细胞膜电势来抑制白血病细胞增殖和促进凋亡;该研究在国内外首次证实PTL抗ALL的作用机制可以通过抑制粘附分子CXCR4表达来抑制白血病细胞粘附骨髓基质细胞。将该项目结果及技术进行推广,已被右江民族医学院附属医院推广应用,取得了良好的社会效益及经济效益,有助于尽早开发、研究、应用PTL在临床上治疗复发难治性急性淋巴细胞白血病,PTL作为一种合理有效、价格适度的中药,可望发展为畅销的抗白血病药,在全社会推广应用,具有广阔的市场前景。
中药对白血病细胞相关基因、蛋白及其逆转耐药的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该项目的研究对象主要集中在白血病细胞株。课题利用MTT、细胞形态观察、流式细胞术、荧光染色、免疫荧光、核酸电泳、RT-PCR、Westernblot等方法,以及先进的基因芯片,激光共聚焦显微镜技术,检测了雄黄和槲皮素对白血病株和白血病人原代细胞的增殖、分化和凋亡的作用,以及相关基因表达的影响,雄黄作用后白血病细胞内基因表达谱的改变,以及槲皮素逆转白血病细胞耐药的效应和作用机制。实验结果显示,雄黄能抑制白血病细胞株的增殖生长,促进株凋亡;雄黄在蛋白水平调控PML基因的表达;基因芯片的检测结果显示:雄黄处理后白血病细胞内基因表达谱发生了改变,其中包括凋亡相关的基因,细胞信号转导相关基因,细胞周期相关蛋白等。
Survivin和B7-1基因对白血病细胞生物学特性的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
任务来源:山西医科大学第二医院博士启动基金(2006-14)。技术原理及性能指标:该课题选取急性白血病(AL)患者为研究对象,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓中Survivin和B7-1mRNA的表达情况,以明确Survivin和B7-1mRNA表达紊乱在AL的发病和复发中的作用;构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,纯化提取重组质粒DNA;将人全长Survivin基因真核载体Survivin-pIRES2-EGFP转染白血病K562细胞:用RT-PCR方法确定人SurvivinmRNA在K562细胞中顺利表达,并随转染时间的延长,SurvivinmRNA表达增加;将转基因后的白血病K562细胞与T淋巴细胞共同作用:用半定量RT-PCR和ELISA方法分别在基因水平和蛋白水平检测Survivin基因转染前后的K562细胞,对T淋巴细胞的CK表达情况的影响。技术的创造性与先进性:国内外关于Survivin转基因修饰的白血病疫苗的研究尚属空白。(1)该课题成功构建带有绿色荧光的人全长Survivin真核表达载体pIRES2-EGFP-Survivin,并在K562细胞中顺利表达,通过转染Survivin增强白血病细胞的免疫原性,为后续建立稳定表达Survivin/B7-1的K562细胞系及白血病的靶向治疗研究奠定基础;(2)分别在基因水平和蛋白水平检测了转基因前后对T淋巴细胞细胞因子表达,以明确转染后的K562细胞对T淋巴细胞功能的影响,为今后白血病疫苗的研究工作奠定基础。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该研究为白血病疫苗的研究和白血病免疫治疗及靶向治疗提供了很好的理论依据和研究基础,使更多的白血病患者解除病痛,提高生活质量,长期生存,甚至痊愈。应用情况及存在问题:转染效率尚不稳定,应尽量将转染效率控制在较小的变化范围内;如果能与其他共刺激分子同时转染K562细胞,刺激T淋巴细胞,效果可能会更佳。
联合基因治疗抑制白血病细胞生长作用的研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
本研究通过导入白血病细胞缺失、突变或表达异常的正常基因来恢复细胞正常生理过程,达到抑制白血病细胞生长的作用。本研究主要包括如下几方面:1.采用脂质体介导外源性野生型p16和p53基因转染白血病细胞株,免疫印渍及免疫细胞化学染色方法检测目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了目的基因的表达对白血病细胞的凋亡作用及促分化作用。结果发现,单独转染野生型p16或p53基因能抑制白血病细胞生长,使白血病细胞G1期细胞数增加,S期细胞减少;而当同时转染该两种基因时发现,恢复两种抑癌基因的表达能促进更多的白血病细胞的凋亡,达到更强的抑制白血病细胞生长作用的目地,并能更有效地促进白血病细胞向成熟方向分化。同时发现,与p16基因相比,p53基因显示出更强的致白血病细胞凋亡作用。2.使用血管内皮生长因子(VEGF)对白血病细胞株干预,发现VEGF一方面诱导血管生成素-2的表达,并由血管生成素-2通过激活促癌基因c-Ets1诱导金属蛋白酶而降解血管基底膜;另一方面,可直接上调肿瘤细胞的金属蛋白酶的表达,这些均有利于白血病细胞的侵袭转移。并且发现,VEGF能促进Bcl-XL蛋白表达,而使Bax收蛋白表达水平下降,通过影响Bcl-XL/Bax表达的比率,调节着caspase-3的活性,进而调节着细胞的凋亡;结果发现,VEGF对白血病细胞株具有抗凋亡作用。3.联合转染p53基因、血管生成抑素基因对白血病细胞的抑制作用:将携带野生型p53基因、血管生成抑素基因的真核表达载体转染白血病细胞,以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期来观察细胞生物学改变,并检测了VEGF、Bcl-2、Bax蛋白表达差异;结果表明,转染后目的基因在白血病细胞中表达,VEGF和Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达加强,联合转染p53和血管生成抑素基因对白血病细胞增殖有较强的抑制作用,且比单独转染这两种基因作用强,两者协同作用的机制可能是共同影响bcl-2、bax表达的途径。P53与血管生长抑素基因相互间促进表达,都能抑制VEGF的产生,导致VEGF表达量下降,共同抑制Bcl-2、促进Bax的表达,使白血病细胞的生长平衡倾向于凋亡。p53和p16INK4a 抑癌基因是细胞周期调节途径(p53途径和RB途径)中两个重要的成份,也是这两条途径受到损害时最易发生遗传学改变的基因之一。在血液系统肿瘤中,p53基因突变多发生于晚期,而慢粒急变、难治或复发白血病中突变率更高,可达60﹪以上。P16INK4a基因主要在淋巴系统肿瘤中发生改变,在急性淋巴细胞白血病(ALL)特别是儿童ALL中p16基因的缺失可达26﹪~75﹪,在急性髓系白血病中,缺失率很低,在慢性髓细胞白血病原始细胞危象期特别是原始淋巴细胞危象期时缺失率可达35﹪。所以,p53和p16INK4a抑癌基因较适合复发、难治急性白血病或慢粒急变白血病的基因治疗。以上研究结果表明,联合多种基因治疗,能更有效地抑制白血病细胞的生长,促进其分化及凋亡,弥补传统抗肿瘤治疗方法的缺陷。
维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立极其耐药机制研究
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:卫生和社会工作
技术简介
该课题组建立维拉帕米耐药性K562(K562/VER)细胞系和阿霉素耐药性人白血病细胞系维拉帕米耐药性亚系(K562/ADM/VER)。采用MTT法测定细胞对维拉帕米的耐药性以及对潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。并建立了一种新的细胞内维拉帕米含量测定法,即高效液相法,这种方法比同位素法更敏感,而且操作简单安全,其敏感性和特异性均很高。研究维拉帕米耐药细胞亚系的相关基因表达变化,进一步探讨维拉帕米的耐药机制。该研究为研究肿瘤耐药逆转剂的耐药性及其对策开辟了道路;为肿瘤临床化疗时正常理解和合理使用耐药逆转剂提供参考,从而提高肿瘤病人的生存率。该项目对肿瘤耐药逆转剂及其调节剂的开发具有一定的应用前景。
组蛋白乙酰化对白血病细胞增殖和分化的影响
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
该研究所属科学技术领域为医药卫生领域,2008年河北省自然科学资金项目,项目编号为C2008000660,已按项目要求完成各项指标,并通过验收。主要技术内容:该研究应用丙戊酸钠体外处理t(8;21)/AML细胞株Kasumi-1细胞和原代细胞,通过运用细胞生物学、流式细胞术以及分子生物学等方法,观察丙戊酸钠对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡及血管新生的影响;该研究建立裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤模型,应用丙戊酸钠对裸鼠进行腹腔注射,运用细胞生物学、流式细胞术、免疫组织化学以及分子生物学等方法检测移植瘤组织细胞分化、凋亡和血管新生等相关指标,观察丙戊酸钠对裸鼠移植瘤的抑制作用;主要目的是探讨组蛋白乙酰化改变与白血病细胞分化和凋亡的关系,试图探寻组蛋白乙酰化改变对血管新生的影响,明确AML1-ETO融合蛋白在t(8;21)急性白血病发病中的作用,明确丙戊酸钠作为HDAC抑制剂对于t(8;21)急性白血病细胞株Kasumi-1细胞及裸鼠移植瘤的抗肿瘤活性和作用机制,为相关后续研究及最终应用于临床治疗血液系统恶性肿瘤提供新的理论依据。主要创新性成果:1.该研究证实了组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对于急性白血病细胞系Kasumi-1细胞增殖有抑制作用,可以诱导其分化、凋亡和抑制血管新生相关因子的表达,为丙戊酸钠临床应用提供体外实验理论依据;2.该研究建立了t(8;21)急性白血病裸鼠移植瘤模型,在国内首次明确了丙戊酸钠可以抑制移植瘤的生长,抑制移植瘤的血管新生,具有抗肿瘤的活性,填补了丙戊酸钠在动物实验中抗肿瘤活性研究的空白;3.明确了丙戊酸钠可以调控AML1靶基因GM-CSF、P21、VEGF启动子区乙酰化组蛋白H3的表达和下调组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)的表达,证实了组蛋白乙酰化水平的变化是t(8;21)急性白血病的发生关键机制之一。推广应用及效益情况:该项目研究成果和相关实验技术与方法在承德医学院附属医院、承德市中心医院等多家单位和科研机构得到推广与应用,在体外实验和动物实验取得预期实验结果的前提下,针对于该地区难治性复发性白血病的患者,给予丙戊酸钠联合其他药物的联合化疗,取得明显的治疗效果。为白血病患者的靶向治疗提供新的治疗策略,取得明显的社会效益。该项目的研究内容已在国内权威专业期刊发表论文17篇。完成该项目共培养硕士研究生16名。推动科技进步的作用:该项目研究成果和技术方法多次被国内学者引用和借鉴,对于提高该研究领域科技水平起到了积极的推动作用,通过对丙戊酸钠抗白血病机制的研究为白血病的临床治疗和后续研究提供技术支撑和理论依据,也为靶向治疗恶性血液病提供新的方向,同时为开发研究老药新用提供新的思路。
密度梯度离心法分离白血病细胞
成熟度:-
技术类型:-
应用行业:科学研究和技术服务业
技术简介
应用于白血病临床应用研究和实验血液学研究,有利于白血病等早期诊断、提高诊断率、疗效观察、缓解与复发的判定等;为实验血液学研究提供纯度高的、不同分化阶段的白血病细胞做样品,使多种研究得到理想的结果。来自白血病干细胞的白血病细胞停滞于不同分化阶段,越是幼稚的细胞其比重越低,比重相差千分之几,故应用适当的不连续密度梯度分离液可以将不同分化程度(比重不同)的白细胞及白血病细胞分离开,不仅纯度高得量多而且使少数细胞浓集易于被发现。已将患者白血病细胞分成6~9种细胞进行形态学分析,用于造血干祖细胞培养、细胞电泳等实验,取得早期诊断、疗效观察、缓解程度判定方面可靠依据。有论文发表可供参考。