肺癌为当今世界上最常见的恶性肿瘤之一。到20世纪末,肺癌发病率位于常见恶性肿瘤的第一位。根据世界卫生组织的统计,每年全世界死于癌症的患者约为800万,占死亡总人数的13%,其中因肺癌而死亡的占到癌症总死亡人群的近20%。近年来,其发病率逐年上升,2012年统计全球肺癌新发病例数占恶性肿瘤的13.0%,死亡病例数占恶性肿瘤的19.4%。虽然化疗方案随着经验及技术的提高对肺癌患者的治疗起到了一定作用,但大部分肺癌的首次发现已经是晚期了,非小细胞肺癌预后还是很差的,总的5年生存率仅10％～15％。因此,早期预测非小细胞肺癌并研究新的治疗方法已经迫在眉睫,深入细致的研究非小细胞肺癌的发生、发展、浸润和转移的机制已成为必然的趋势。Yes相关蛋白（Yes-associated protein,YAP）是经典Hippo信号通路的主要效应因子,被Wts磷酸化而失活。YAP的过度表达会造成组织器官的增大。因此,Hippo信号通路中其他因子的负性调控YAP水平,和YAP过度表达类似,Hippo信号通路中其他因子的突变能增加YAP的活性,导致下游转录因子cyclinE、DIAP1等表达增加,促进细胞的增殖,抑制细胞的凋亡。近来的研究证明,YAP是一个癌基因,作为Hippo信号通 路的下游信号分子,YAP具有促进细胞增殖,抑制细胞调亡,导致细胞接触性抑制丧失及促进细胞恶性转化的作用。MCM蛋白与细胞周期密切相关, 是启动细胞DNA复制并调控细胞由G1期进入S期的关键性蛋白,其本质是1种核蛋白复合物。目前发现在静止/分化细胞中MCM蛋白不表达,而在增殖/肿瘤细胞中呈高表达,是近年来发现的1种较好地反映细胞增殖活性的新指标。大量研究表明,MCM蛋白能够敏感而特异地反映细胞的增殖状况,在判断肿瘤的恶性度及评估预后方面有着较重要的意义。MCM5是MCM蛋白复合物之一,是一种与细胞增殖密切相关的因子,它的检测可直接反映MCM蛋白的表达水平。大多研究表明,MCM5与恶性肿瘤的发生、肿瘤细胞的浸润和转移及恶性程度关系密切,可以作为预测恶性肿瘤发生发展和判断预后的生物学指标,为恶性肿瘤的临床治疗提供可靠的理论依据。本课题总体思路:应用实时定量逆转录多聚酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR） 及Western Blot方法对NSCLC患者组织标本中的YAP进行检测,观察其在病变组织中的表达,探讨其与NSCLC的关系及其在非小细胞肺癌发生发展中的作用,并应用免疫组化方法对非小细胞肺癌石蜡包埋组织标本中的YAP和MCM5进行联合检测,观察二者在病变组织中的表达,分析其与非小细胞肺癌的病理分化程度、手术-病理分期、淋巴结转移的关系及相关性,为非小细胞肺癌的发展及预后判断提供一种新的参考指标。技术路线:1应用实时定量逆转录多聚酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR） 对NSCLC患者组织标本中的YAP进行检测,观察其在病变组织中的表达。2应用Western Blot方法对NSCLC患者组织标本中的YAP进行检测,观察其在病变组织中的表达。3应用免疫组化方法对非小细胞肺癌石蜡包埋组织标本中的YAP和MCM5进行联合检测,观察二者在病变组织中的表达。4分析YAP与NSCLC的关系及其在非小细胞肺癌发生发展中的作用。5分析YAP和MCM5与非小细胞肺癌的病理分化程度、手术-病理分期、淋巴结转移的关系。6分析YAP和MCM5在非小细胞肺癌中表达的相关性。 本课题结论: 1. YAP与MCM5可能参与了非小细胞肺癌的发生和演进的过程。 2.YAP与MCM5在非小细胞肺癌的发生、发展和浸润转移的过程可能具有协同作用。 3. YAP与MCM5蛋白的联合检测,可能成为判断非小细胞肺癌发生发展和评价预后的有效参考指标之一,对于非小细胞肺癌的早期预测可能具有重要的临床意义。
黄教授
