流行性感冒（简称流感）,是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病。流感不仅严重危害全球经济发展和社会稳定,还严重威害人类健康,全球每年有5%-10%的成人和20%-30%的儿童感染流感病毒,造成2-5百万例的重症患者,死亡25-50万人。危害人类的流感病毒主要包括A（H1N1）、A（H3N2）、A（H1N1）pdm09等甲型流感病毒和乙型流感病毒,此外,近年来不断散发的对人类高致病性的禽流感病毒A（H5N1）和A（H7N9）也严重威胁人类健康。面对流感威胁,早发现、早干预和早诊断、早治疗对流感疫情的有效控制和流感患者的早日康复具有重要意义。病毒培养和核酸检测是常用的流感检测方法,但由于费时、费力、操作复杂且成本较高等问题,不能满足疫情现场、医院门诊和口岸入境筛查的快速检测需要,因此,有必要建立高灵敏、操作简便的流感免疫诊断试剂盒,为流感防控提供有用的检测工具。2004年起,本团队针对流感病毒的血凝素蛋白（HA）和核蛋白（NP）筛选单克隆抗体（单抗）,从中发现一系列H亚型特异性和型特异性的HA广谱单抗和NP广谱单抗,为研发系列流感免疫诊断试剂提供关键的活性原料;同时,为满足不同场合的流感检测需要,建立酶联免疫渗滤、酶联免疫层析、酶联免疫吸附试验、化学发光免疫试验等免疫检测系统,为建立系列流感免疫诊断试剂提供关键的免疫检测技术平台。主要研究成果如下：（1）发现H5亚型HA广谱单抗,在此基础上基于酶联免疫渗滤技术建立了一种适于现场快速检测H5N1等H5亚型禽流感病毒的抗原检测试剂盒“H5亚型禽流感病毒HA抗原检测试剂盒（Dot-ELISA）”,获得CFDA注册受理号（准10-1414）,灵敏度优于国外同类试剂盒（病毒学报. 2005（06） ; 病毒学报, 2006, （06）： 445-449; 病毒学报. 2007（02） ; 病毒学报. 2007（02） ;J Virol 2008,82：1798-1807; J Virol Methods 2008,153：213-215;J Infect Dis 2009,199：49-58; 授权专利：ZL 200510007308.X;ZL 200810110869.6;ZL201310131000.0;US8603467B2）。（2）发现甲型流感（FluA）病毒核蛋白（NP）广谱单抗, 在此基础上基于酶联免疫渗滤技术,建立了一种适合现场快速检测甲型流感的诊断试剂“甲型流感病毒抗原诊断试剂盒（Dot-ELISA）”,并获得CFDA医疗器械注册证书（国食药监械（准）字2009第3400979号）,性能优于国外同类试剂盒;基于免疫化学发光法建立了高性能的“甲型流感病毒高通量诊断试剂盒（化学发光法）”,适合大规模疫情爆发时的大样本高通量检测需要。（中国人兽共患病学报, 2008, （01）： 22-25;J virol Methods 2011,50：153-155;J Clin Virol 2011,50：153-155;Virology, 2014, 464：11-20; J Med Virol 2014,86：995-1002; 中国国境卫生检疫杂志. 2015（04））。（3）发现新甲型H1N1病毒[A（H1N1）pdm09]的HA特异性单抗,在此基础上,基于酶联免疫法建立了全球首个能特异性检测A（H1N1）pdm09的甲型H1N1流感病毒（2009）HA抗原检测试剂盒（酶联免疫法）, 并获得CFDA医疗器械注册证书（国食药监械（准）字2010第3400974号）,能从10几种甲型流感病毒中直接鉴别出新甲型H1N1流感病毒,灵敏度优于国外同类试剂盒（Clin Microbiol Infect 2011; 17： 1574-1580; J Formos Med Assoc. 2012 Dec;111（12）：693-7）。（4）发现禽流感病毒NP蛋白特异性单抗,在此基础上建立了一种仅特异识别禽流感病毒的抗原快速检测方法AIV-Dot-ELISA,为快速鉴别禽类流感病毒和人类流感病毒感染提供了一种有用的分析检测工具（中国人兽共患病学报,2014,（8）：7-11+16）。（5）发现乙型流感病毒NP蛋白特异性广谱单抗,在此基础上,于2013年研制出国内第一个适合现场快速检测乙型流感的免疫诊断试剂“乙型流感病毒抗原检测试剂盒（Dot-ELISA 法）”,并获得CFDA医疗器械注册证书（国食药监械（准）字2014第3400277号）。（6）发现人类甲型流感A（H1N1）和A（H3N2）的HA特异性广谱单抗,在此基础上于2014年3月研制出国际上第一个人适合现场快速鉴别检测甲型H1/H3亚型流感病毒的“人甲型流感病毒HA抗原检测试剂盒（酶层析法）”,并获得CFDA医疗器械注册证书（国食药监械（准）字2014第3400584号）。（7）基于上述描述的甲乙型流感病毒NP蛋白特异性广谱单抗和酶联免疫层析技术,建立了适合现场快速鉴别检测甲乙型流感病毒的“甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（酶免层析法）”,并获得CFDA医疗器械注册证书（国食药监械（准）字2014第3400585号）。本项目产品已在国内占据市场主导地位,在西京医院、北京疾病预防与控制中心、厦门国际旅行卫生保健中心等几十家单位广泛使用,产品累计销售额超过1200万人民币,产品性能良好,得到广泛认可,为流感疫情的有效控制及减少流感患者的死亡率和重症率等,做出重大的贡献。该课题研制了6 种流感病毒蛋白的单克隆抗体,开发了7 个流感病毒诊断试剂盒,其中两个试剂盒己获SFDA 注册,实现成果转化收入1000 万元。研制的单克隆抗体为我国监控流感病毒抗原变异提供试剂原料。建立了大鼠单克隆抗体技术,能与小鼠单克隆抗体技术形成互补,为诊断试剂及治疗性单抗提供识别新表位的单抗来源。课题发表SCI 论文3 篇,培养了7 名从事病毒学研究和开发诊断试剂的科研人员,完成了课题规定的任务目标。该课题的成果能够满足国内各类流感病毒诊断、防控需要,并建立了技术储备,己产生了可观的经济效益和良好的社会效益。
黄教授
